닭 染色體의 分離 分析 方法에 관한 硏究

孫始煥,吳鳳國 서울대학교 농과대학 실험목장 1988 서울대학교 농과 대학 부속 실험 목장 보고서 Vol.1 No.1

닭 염색체의 분리 분석 방법에 관한 연구

손시환,오봉국 한국가금학회 1987 韓國家禽學會誌 Vol.14 No.2

본 연구에서는 가금에 있어 세포유전학적 방법을 이용하여 닭 염색체의 분리방법과 G, C-banding에 의한 분염분석 방법을 재고하여 보다 명확한 염색체의 형태적 양상을 제시하였다. 염색체의 분리는 성장중인 초기배아를 이용하므로써 유사분열 중기상을 쉽게 포악할 수 있었으며, 성장 4-5일째의 배아조직으로부터 염색체의 분리는 다소 불편함이 많았다. 가금에 있어 염색체 분리기술중 가장 중요한 것으로 적합한 sample의 채취와 적절한 중기상의 유도, hypotonic 처리에 따른 뚜렷한 형태의 유도, 도말방법 및 염색의 처리과정이다. 또한 보다 명확한 염색체의 분석을 위하여서는 중기 분열상중 초기 중기 상태의 상을 포착함이 바람직하다. G. C-banding 처리를 위해서는 공히 충분하고도 완전히 건조된 air-dried prepration된 sample을 이용하여야 바람직한 결과를 얻을 수 있으며, slide의 보존시간에 따라 band 양상에 많은 차이를 나타낸다. G-banding 양상에 크게 영향하는 요인으로서는 trypsin의 농도, 처리시간, 처리온도가 주된 작용을 하고, Giemsa solution에 사용하는 buffer의 pH도 크게 작용하는 것으로 나타났다. C-banding에 있어서는 Ba(OJ)$_2$의 농도 처리시간, 처리온도가 큰 영향을 미친 바 다소 짧은 시간의 처리가 바람직한 양상을 보이고, 처리전 HCl 처리로서 세포들의 균일성을 가하고, 처리후 철저한 수세가 좋은 결과를 나타내었다. Band 양상의 보다 정확한 해석을 위해서는 densitometer를 이용하므로써 구체적 양상을 분석할 수 있었다. The purpose of this paper to present morphological normal chick chromosomes and develope avian cytogenetic techniques including chromosome preparation and banding technique. The early chick embryos provide a consistent source of material with hish mitotic cells. Although chick embryo tissue gives excellent preparations, the 4-5 days embryo is somewhat incovenient materials, Most imp of ant for avian Chromosome analysis are the technical protocols to achieve adequate preservation, spreading, and staining of the full chromosome complement. To precise chromosome analysis, pro-metaphase states are required. Best results of banding will be obtained from air dried slides prepared from early chick embryos that have been aged at least 1 week. Good G-banding differentiation is achieved by adequate trypsin digestion fellowed by staining in Goe,sa dye. The results of C-banding is influenced by many factors including the conditions of Ba(OH)$_2$, HCl treatment, and state of rinsing. In addition to precisely interprets banding patterns, the densitometric analysis is recommended.

Ficoll을 이용한 닭 염색체 분리 기법에 관한 연구

손시환,류은경 진주산업대학교 농업기술연구소 1999 農業技術硏究所報 Vol.12 No.-

본 연구는 닭의 혈액을 이용한 염색체의 분리 방법을 개선하고 자 ficoll을 이용한 순수 백혈구의 분리방법을 개발하고 한편 정밀 핵형 분석을 위한 고해상 염색체를 유기할 수 있는 새로운 배양방법도 제시하였다. 시험 분석은 실용산란계(ISA brown C. C.) 암,수 50개체의 혈액으로부터 백혈구 배양법에 의한 염색체 분리를 수행하고 관행적인 GTG-banding과 high resolution banding을 실시하였다. 닭의 혈액으로 부터 염색체 분리는 ficoll을 이용한 순수 백혈구 분리법을 응용 적용함으로서 중기상의 획득이 획기적으로 개선되었고, 관행적 방법에 비해 월등히 높은 분열지수(mitotic index)를 얻을 수 있었다. 또한 이를 이용한 GTG-banding과 high resolution banding으로서 공히 각 상동염색체별 일관성이 있는 명확하고 특징적 band양상을 얻을 수 있었다. high resolution banding에 의한 대형염색체들에 대한 평균 출현 band수는 150여개로서 관행적인 GTG-banding에 의한 80개의 band보다는 약 70여개정도 많은 band양상을 보였다. 또한 출현 band수의 범위도 GTG-banding의 경우 분석된 염색체간에 다소 큰 변이를 보이나, high resolution banding의 경우 세포들간의 동기화가 이루어져 균일한 양상의 band수를 나타내었다. 따라서 닭에 있어 ficoll처리에 의한 high resolution banding법은 기존 GTG-banding법을 대신할 뿐만 아니라 분자유전학적 연구 등을 위한 보다 정밀한 염색체 표지로서의 역할과 개선된 핵형분석의 자료로서 활용이 가능하리라 사료된다. This study was carried out to develop the method of chromosome preparation from chick blood culture and to identify chick chromosomal mark. Using the ficoll treatment in lymphocyte purification and application of high resolution banding technique in culture, a success result was obtained. The chromosomes were prepared from this culture method with 50 commercial chicks and then we analyzed GTG-banding and high resolution banding. The yield of metaphase spreads and percentage of mitotic index were improved by using of ficoll treatment in lymphocyte culture. The characteristic and distinctive patterns of GTG-band and high resolution band were obtained on each chromosome. The number of discernible bands on macrochromosomes was approximately 150 bands in high resolution banding and 80 bands in GTG-banding. The number of analyzed bands was much more variable in GTG-banding than in high resolution banding. This results implied that the growth cells were synchronized by high resolution banding treatment. Contrasting with a habitual GTG-banding in chicken chromosomes, the ficoll treatment and high resolution banding technique are very useful skill for advanced karyotype analysis and help more precise designation for molecular works.

기고 - 닭 성감별에 대하여

손시환 대한양계협회 2025 월간 양계 Vol.57 No.6

학술발표회 : 육종 ( 구두발표 ) ; 혈액배양을 이용한 포유동물의 염색체 분리기법에 관한 고찰

손시환,김철욱 한국동물자원과학회 ( 구 한국축산학회 ) 1994 한국동물자원과학회 심포지움자료집 Vol.- No.-

한국 가금육종 발달사

손시환 한국가금학회 2023 한국가금학회 심포지움 Vol.2023 No.5

FISH 기법을 이용한 소 수정란의 성감별과 산자 생산

손시환,박희성 한국수정란이식학회 2007 한국수정란이식학회 학술대회 Vol.2007 No.1

본 연구에서는 소의 체외 수정란에 대해 Y 염색체 특이 DNA 표지를 이용하여 FISH 기법으로서 수정란의 성감별을 수행하고 이를 이식하여 산전 성감별 개체 생산을 시도하였다. 본 연구에 이용된 Y-염색체 특이 DNA probe는 bovine male specific DNA로 알려진 btDYZ-1의 385bp 단편으로 제작하였고, Dig-PCR 방법으로 labeling하였다. 수정란의 성감별은 IVF로서 생산된 단계의 수정란을 공시하고 이들로부터 단일할구를 생검하여 분석하였다. 생검 방법은 투명대를 laser로 drilling하고 개의 할구를 squeezing하여 분리하였으며 demi-embryo는 1일간 재 배양하여 배반포기 단계에서 이식하였다. 우선, 본 probe의 신뢰성을 검정하기 위하여 생검된 할구는 FISH 기법으로 Y 염색체 존재 여부를 판단하고, 이의 demi-embryo는 재 배양하여 중기상을 유도하여 핵형분석한 후 비교 검토한 바 97.6%의 일치율을 나타내었다. 한편, 수정란에서 성감별을 위한 FISH의 적용 여부를 검토하고자 총 3937개의 공시란 중 3657개(93%)가 분석이 가능하였고, 이들 중 45.8%가 Y 염색체 특이적 접합 발현 양상이 나타났다. 본 결과를 토대로 경남 진주 인근 지역 농장의 15두의 소를 대상으로 성 감별 수정란을 이식한 결과, 7두가 임신한 것으로 확인되었고 이들 중 5마리가 출산하였다. 뿐만 아니라 출산된 송아지들은 모두 예견된 성과 100% 일치하는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구에서 적용한 FISH 기법은 수정란의 성감별에 효율성이 높고 매우 높은 정확성을 나타냄에 따라 실질적으로 성감별 수정란의 대량생산이 가능할 것으로 사료되며, 농가차원에서 산업적 실용화가 될 수 있을 것으로 기대한다.twork descrition)를 통해 교통분석후의 제반 교통특성(교통량, 교통량/용량 비(比), 속도 등)을 교통망상에 표시할 수 있음으로서 의사결정에 보다 많은 도움을 줄 수 있을 것이다. 비트율의 증가와 화질 열화는 각각 최대 1.32%와 최대 0.11dB로 무시할 수 있을 정도로 작음을 확인 하였다.을 알 수 있었다. 현지관측에 비해 막대한 비용과 시간을 절약할 수 있는 위성영상해석방법을 이용한 방법은 해양수질파악이 가능할 것으로 판단되며, GIS를 이용하여 다양하고 복잡한 자료를 데이터베이스화함으로써 가시화하고, 이를 기초로 공간분석을 실시함으로써 환경요소별 공간분포에 대한 파악을 통해 수치모형실험을 이용한 각종 환경영향의 평가 및 예측을 위한 기초자료로 이용이 가능할 것으로 사료된다.염총량관리 기본계획 시 구축된 모형 매개변수를 바탕으로 분석을 수행하였다. 일차오차분석을 이용하여 수리매개변수와 수질매개변수의 수질항목별 상대적 기여도를 파악해 본 결과, 수리매개변수는 DO, BOD, 유기질소, 유기인 모든 항목에 일정 정도의 상대적 기여도를 가지고 있는 것을 알 수 있었다. 이로부터 수질 모형의 적용 시 수리 매개변수 또한 수질 매개변수의 추정 시와 같이 보다 세심한 주의를 기울여 추정할 필요가 있을 것으로 판단된다.변화와 기흉 발생과의 인과관계를 확인하고 좀 더 구체화하기 위한 연구가 필요할 것이다.게 이루어질 수 있을 것으로 기대된다.는 초과수익률이 상승하지만, 이후로는 감소하므로, 반전거래전략을 활용하는 경우 주식투자기간은 24개월이하의 중단기가 적합함을 발견하였다. 이상의 행태적 측면과 투자성과측면의 실증결과를 통하여 한국주식시장에 있어서 시장수익률을 평균적으로 초과할 수 있는 거래전략은 존재하므로 이러한 전략을 개발 및 활용할 수 있으며, 특히, 한국주식시장에 적합한 거래전략은 반전거래전략이고, 이 전략의 유용성은 투자자가 설정한 투자기간보다 더욱 Sexing from bovine embryos fertilized in vitro implicates a possibility of the sex controlled cattle production. This study was carried out to produce the sex determined cattle through the embryonic sexing by fluorescence in situ hybridization (FISH) technique. FISH was achieved in in vitro fertilized bovine embryos using a bovine Y-specific DNA probe constructed from the btDYZ-1 sequence. Using this probe, a male-specific signal was detected on 100% of Y-chromosome bearing metaphase specimens. The analyzable rate of embryonic sexing by FISH technique was about 93% (365/393) regardless of embryonic stages. As tested single blastomere by FISH and then karyotype with their biopsied embryos, the accuracy of sex determination with FISH was 97.6%. We tried the embryo transfer with sex determined embryos on 15 cattle. Among them, the 5 cattle delivered calf with expected sex last year.

양계업 경쟁력 강화 방안 - 계란품질에 미치는 요인

손시환,Son, Si-Hwan 대한양계협회 2015 월간 양계 Vol.47 No.8

토종실용닭의 암수 간 산육 능력 및 스트레스 반응 정도 비교

손시환,조은정,김기곤,신가빈,이슬기 한국가금학회 2022 한국가금학회지 Vol.49 No.2

This study compared the production and physiological characteristics of male and female Korean native commercial chickens. We investigated the growth performance, vitality, and stress response of 479 male and 608 female chickens from 1 d to 12 weeks of age. The body weight, feed consumption and feed conversion ratio were measured as growth performance. The survival rate, amount of telomeric DNA, DNA damage rate, heterophil-lymphocyte ratio (H/L ratio), and heat shock protein (HSP)-70, HSP-90α, and HSP-90β gene expression levels were analyzed as indicators of vitality and stress response. Body weight was significantly higher in male chickens than in female chickens after 2 weeks of age (P<0.01). Feed intake was higher in male chickens than in female chickens, whereas the feed conversion ratio showed the opposite trend. The survival rate was significantly higher in female chickens than in male chickens (82.8% vs. 73.8%, P<0.05). Stress response analysis revealed no differences between male and female chickens in terms of telomeric DNA content, DNA damage rate, H/L ratio, and HSP gene expression levels. Taken together, it was concluded that there was a significant difference in the growth performance and survival rate between male and female Korean native commercial chickens, whereas there was no difference in the degree of stress response between them. Therefore, in terms of the productivity of Korean native commercial chickens, it is judged that separate-sex rearing is much more advantageous than mixed rearing, regardless of the physiological characteristics of males and females. 본 연구는 토종실용닭 암수 간의 생산 특성 및 생리적 특성을 비교하고자 이들의 산육 능력, 강건성 및 스트레스 반응 정도를 살펴보았다. 시험은 토종실용닭 암컷 608수와 수컷 479수를 대상으로 1일령부터 12주간 실시하였다. 산육 능력의 평가는 체중, 사료 섭취량, 사료요구율을 조사하였고, 강건성 및 스트레스 반응 정도의 측정은 생존율, 텔로미어 함유율, DNA 손상률, heterophil-lymphocyte 비율, HSP-70, HSP-90α 및 HSP-90β 유전자 발현율을 분석하였다. 시험 결과, 암수 간의 체중은 2주령부터 시험 종료 시까지 수컷이 암컷보다 유의하게 높았고(P<0.01), 사료 이용성은 시험 전 기간 수컷이 암컷보다 많은 사료를 섭취한 반면 낮은 사료요구율을 보였다. 시험 전 기간 생존율은 암컷이 82.8%, 수컷이 73.8%로 암컷이 수컷보다 유의하게 높았다(P<0.05). 스트레스 반응 지표 분석 결과, 텔로미어 함유율, DNA 손상률, heterophil-lymphocyte 비율 및 HSP 유전자 발현율 모두에서 암컷과 수컷 간의 차이는 없는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 종합할 때, 토종실용닭 암수 간의 산육 능력과 생존율의 차이는 있으나 스트레스 반응 정도의 차이는 없는 것으로 판단된다. 따라서 토종실용닭의 생산성 측면에서 암수의 생리적 특성과 무관하게 암컷과 수컷을 분리하여 사육하는 것이 바람직한 것으로 사료된다.

동물 염색체 분리를 위한 최적 혈액배양 조건에 관한 연구

손시환,이정업 한국동물번식학회 2011 Reproductive & developmental biology Vol.35 No.3