소 부신수실 크롬친화성 세포에서 Nicotine의 장기간 자극으로 유발된 Proenkephalin A mRNA의 증가 및 [Met⁵]-enkephalin의 분비 증가가 Lipoxygenase 경로에 의해 매개됨

서홍원(Hong-Won Suh),김영희(Yung-Hi Kim) 대한약리학회 1993 대한약리학잡지 Vol.29 No.2

소 부신수실 크롬친화성 세포(BAMC)에서 [Met⁵]-enkephalin (ME)의 분비와 Proenkephalin A (proENK) mRNA의 함량에 대한 nicotine의 영향과 이에 대한 indomethacin, nordihydroguaiaretic acid(NDGA) 및 captopril의 작용을 연구하였다. 10 uM Nicotine으로 BAMC 세포를 장기간 자극시 proENK mRNA의 함량과 배양액으로의 ME 분비가 유의하게 증가하였다. BAMC 세포를 NDGA(lipoxygenase 억제제, 10 uM), indomethacin (cyclooxygenase 억제제), captopril (angiotensin 변환효소 억제제)만으로 처리시에는 ME 분비와 proENK mRNA의 함량에 영향이 없었다. Nicotine에 의한 ME 분비와 proENK mRNA 함량의 증가는 NDGA에 의하여 억제되었다. 그러나 indomethacin과 captopril은 nicotine의 작용에 대하여 아무 영향이 없었다. 이들 결과는 nicotine에 의한 ME 분비와 proENK mRNA 함량의 증가가 부분적으로 lipoxygenase 경로에 의해 매개되며, cyclooxygenase 및 내재성 renin-angiotensin 경로는 관련되지 않음을 나타낸다. The effect of nicotine on the secretion of [Met⁵]-enkephalin (ME) in addition to proenkephalin A (proENK) mRNA levels and effects of indomethacin, nordihydroguaiaretic acid (NDGA), and captopril on nicotine-induced responses were studied in bovine adrenal medullary chromaffrin (BAMC) cells. Long-term exposure of BAMC cells to nicotine at a concentration of 10μM significantly increased proENK mRNA level and the secretion of ME into the medium. Treatment of BAMC cells with NDGA (a lipoxygenase inhibitor, 10μM), indomethacin (a cycloooxygenase inhibitor) or captopril (an angiotensin converting enzyme inhibitor) alone did not affect ME secretion and proENK mRNA levels. The pretreatment of BAMC cells with NDGA inhibited the increased ME secretion and proENK mRNA level induced by nicotine. However, indomethacin and captopril did not affect nicotine-induced responses. Our results indicate that neuronal regulations of ME secretion and proENK mRNA level induced by nicotine in BAMC cells are in part mediated by a lipoxygenase-but not cyclooxygenase-and endogenous renin-angiotensin pathway.

The Increases of Proenkephalin A mRNA Levels and the Secretion of $[Met^{5}]-Enkephalin$ Induced by Long-term Stimulation with Nicotine are Mediated by a Lipoxygenase Pathway in Bovine Adrenal Medullary Chromaffin Cells

서홍원,김영희,Suh, Hong-Won,Kim, Yung-Hi The Korean Society of Pharmacology 1993 대한약리학잡지 Vol.29 No.2

소 부신수실 크롬친화성 세포(BAMC)에서 $[Met^5]-enkephalin$ (ME)의 분비와 Proenkephalin A (proENK) mRNA의 함량에 대한 nicotine의 영향과 이에 대한 indomethacin, nordihydroguaiaretic acid(NDGA) 및 captopril의 작용을 연구하였다. 10 uM Nicotine으로 BAMC 세포를 장기간 자극시 proENK mRNA의 함량과 배양액으로의 ME 분비가 유의하게 증가하였다. BAMC 세포를 NDGA(lipoxygenase 억제제, 10 uM), indomethacin (cyclooxygenase 억제제), captopril (angiotensin 변환효소 억제제)만으로 처리시에는 ME 분비와 proENK mRNA의 함량에 영향이 없었다. Nicotine에 의한 ME 분비와 proENK mRNA 함량의 증가는 NDGA에 의하여 억제되었다. 그러나 indomethacin과 captopril은 nicotine의 작용에 대하여 아무 영향이 없었다. 이들 결과는 nicotine에 의한 ME 분비와 proENK mRNA 함량의 증가가 부분적으로 lipoxygenase 경로에 의해 매개되며, cyclooxygenase 및 내재성 renin-angiotensin 경로는 관련되지 않음을 나타낸다. The effect of nicotine on the secretion of $[Met^{5}]-enkephalin$ (ME) in addition to proenkephalin A (proENK) mRNA levels and effects of indomethacin, nordihydroguaiaretic acid (NDGA), and captopril on nicotine-induced responses were studied in bovine adrenal medullary chromaffrin (BAMC) cells. Long-term exposure of BAMC cells to nicotine at a concentration of $10{\mu}M$ significantly increased proENK mRNA level and the secretion of ME into the medium. Treatment of BAMC cells with NDGA (a lipoxygenase inhibitor, $10{\mu}M$), indomethacin (a cycloooxygenase inhibitor) or captopril (an angiotensin converting enzyme inhibitor) alone did not affect ME secretion and proENK mRNA levels. The pretreatment of BAMC cells with NDGA inhibited the increased ME secretion and proENK mRNA level induced by nicotine. However, indomethacin and captopril did not affect nicotine-induced responses. Our results indicate that neuronal regulations of ME secretion and proENK mRNA level induced by nicotine in BAMC cells are in part mediated by a lipoxygenase-but not cyclooxygenase-and endogenous renin-angiotensin pathway.

선천성 고혈압쥐에서의 Opioid에 의한 진통작용과 Proenkephalin유전자 발현에 대한 연구

서홍원(Hong-Won Suh),이태희(Tae-Hee Lee),송동근(Dong-Keun Song),최성란(Seong-Ran Choi),정전섭(Jun-Sub Jung),김영희(Yung-Hi Kim) 대한약리학회 1995 대한약리학잡지 Vol.31 No.1

8주, 18주, 그리고 32주된 Spontaneously Hypertensive Rats (SHR)과 Wistar-Kyoto Rats(WKY)과의 blood pressure(혈압)를 측정하여본 결과 SHR 그룹이 WKY에 비해 19에서 70 mmHg 차이로 SHR 그룹이 WKY group에 비하여 혈압이 높았다. 18주된 SHR과 WKY에서 제 3 뇌실내 (intraventricular)로 투여된 morphine과 β-endorphin의 진통작용을 검색하여 보았다. WKY group에 비하여 SHR group에서 뇌실내로 투여된 β-endorphin은 진통작용에 있어서 상승작용 (potentiation)을 보임을 발견하였고 뇌실내로 투여된 morphine은 SHR group에서 약간만 상승작용을 보였다. SHR과 WKY group간에 opioid의 진통작용에 있어서 중요한 역할을 하는 Midbrain과 Medulla (pons), 그리고 spinal cord (척수)의 lumbar부위의 [Met⁵]-enkephalin과 proenkep-halin A mRNA level을 측정하여 보았다. SHR과 WKY group간의 [Met⁵]-enkephalin과 proenkephalin mRNA의 양은 별로 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과로 미루어 볼때 SHR group에서 뇌실내로 투여된 β-endorphin은 그의 진통효과에 있어서 보인 상승작용은 척수상부에 위치하고 있는 opioid deptide의 양이 변해서가 아니라 다른 기전에 의하여 조절되어지고 있음을 시사한다. The present studies were carried out to determine if antinociceptive action of morphine and β-endorphin administered intraventricularly was changed in. pentobarbital anesthetized spontaneously hypertensive rats (SHR) and Wistar-Kyoto (WKY) rats. Antinociception was assessed by the tail-flick test. The ED₅₀ values of antinociception for morphine administered intraventricularly were 1.9 and 1.2 nmol for WKY and SHR rats, respectively. The ED₅₀ values of antinociception for β-endorphin administered intraventricularly were 0.40 and 0.12 nmol for WKY and SHR rats, respectively. The [Met⁵]-enkephalin (ME) and proenkephalin mRNA levels in midbrain, pons and medulla, or lumbar section of the spinal cord in WKY and SHR rats were measured by the radioimmunoassay and Northern blot assay, respectively. There were no differences of ME and proenkephalin mRNA levels in these tissues between WKY and SHR rats. The results suggest that β-endorphin but not morphine administered intraventricularly produces a greater antinociception in SHR rats. This increased antinociceptive effect of β-endorphin in SHR rats may be not, at least, due to the alterations of ME And proenkephalin mRNA levels in the midbrain, pons and medulla, or spinal cord.

Study of the Antinociception Induced by Opioids and the Proenkephalin Gene Expression in Spontaneously Hypertensive Rats

서홍원,이태희,송동근,최성란,정전섭,김영희,Suh Hong-Won,Lee Tae-Hee,Song Dong-Keun,Choi Seong-Ran,Jung Jun-Sub,Kim Yung-Hi The Korean Society of Pharmacology 1995 대한약리학잡지 Vol.31 No.1

8주, 18주, 그리고 32주된 Spontaneously Hypertensive Rats (SHR)과 Wistar-Kyoto Rats(WKY)과의 blood pressure(혈압)를 측정하여본 결과 SHR 그룹이 WKY에 비해 19에서 70 mmHg 차이로 SHR 그룹이 WKY group에 비하여 혈압이 높았다. 18주된 SHR과 WKY에서 제 3 뇌실내 (intraventricular)로 투여된 morphine과 ${\beta}-endorphin$의 진통작용을 검색하여 보았다. WKY group에 비하여 SHR group에서 뇌실내로 투여된 ${\beta}-endorphin$은 진통작용에 있어서 상승작용 (potentiation)을 보임을 발견하였고 뇌실내로 투여된 morphine은 SHR group에서 약간만 상승작용을 보였다. SHR과 WKY group간에 opioid의 진통작용에 있어서 중요한 역할을 하는 Midbrain과 Medulla (pons), 그리고 spinal cord (척수)의 lumbar부위의 $[Met^5]-enkephalin$과 proenkep-halin A mRNA level을 측정하여 보았다. SHR과 WKY group간의 $[Met^5]-enkephalin$과 proenkephalin mRNA의 양은 별로 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과로 미루어 볼때 SHR group에서 뇌실내로 투여된 ${\beta}-endorphin$은 그의 진통효과에 있어서 보인 상승작용은 척수상부에 위치하고 있는 opioid deptide의 양이 변해서가 아니라 다른 기전에 의하여 조절되어지고 있음을 시사한다. The present studies were carried out to determine if antinociceptive action of morphine and ${\beta}-endorphin$ administered intraventricularly was changed in. pentobarbital anesthetized spontaneously hypertensive rats (SHR) and Wistar-Kyoto (WKY) rats. Antinociception was assessed by the tail-flick test. The $ED_{50}$ values of antinociception for morphine administered intraventricularly were 1.9 and 1.2 nmol for WKY and SHR rats, respectively. The $ED_{50}$ values of antinociception for ${\beta}-endorphin$ administered intraventricularly were 0.40 and 0.12 nmol for WKY and SHR rats, respectively. The $[Met^5]-enkephalin$ (ME) and proenkephalin mRNA levels in midbrain, pons and medulla, or lumbar section of the spinal cord in WKY and SHR rats were measured by the radioimmunoassay and Northern blot assay, respectively. There were no differences of ME and proenkephalin mRNA levels in these tissues between WKY and SHR rats. The results suggest that ${\beta}-endorphin$ but not morphine administered intraventricularly produces a greater antinociception in SHR rats. This increased antinociceptive effect of ${\beta}-endorphin$ in SHR rats may be not, at least, due to the alterations of ME And proenkephalin mRNA levels in the midbrain, pons and medulla, or spinal cord.

배양된 흰쥐 뇌간 신경세포에서 5-Hydroxytryptamine 흡수에 대한 각종 전통 생약 추출물의 억제 효과

조현미,정전섭,이태희,손건호,서홍원,송동근,김영희,Cho, Hyun-Mi,Jung, Jun-Sup,Lee, Tae-Hee,Son, Kun-Ho,Suh, Hong-Won,Song, Dong-Keun,Kim, Yung-Hi 한국생약학회 1995 생약학회지 Vol.26 No.4

Crude methanolic(80%) extracts from 109 kinds of traditional herbal drugs were randomly screened for inhibitory effects on 5-hydroxytryptamine(5-HT) uptake in primary cultured rat brainstem neurons. Rat brainstem neurons were cultured from embryonic day 14, and maintained for 7-9 days in vitro. Clomipramine (500 nM), a reference drug, decreased 5-HT uptake to 16% of control values. Of the 109 herbal drugs screened, Citri immaturi Pericarpium(靑皮), Coptidis Rhizoma(黃蓮), Cnidii Rhizoma(土川芎) showed the most potent 5-HT uptake inhibiting activities. These herbal drugs, at the concentration of $10{\;}{\mu}g/ml$, inhibited 5-HT uptake 69, 69, and 57% respectively, when inhibition(%) was expressed as a relative value compared to the 500 nM clomipramine-induced inhibition.

뇌간 신경세포 배양에서 세로토닌 분비에 대한 N-methyl-D-aspartic Acid(NMDA) 및 Non-NMDA 수용체 효현제들의 작용

유순미,김율아,송동근,서홍원,김영희,Yoo, Soon-Mi,Kim, Yul-A,Song, Dong-Keun,Suh, Hong-Won,Kim, Yung-Hi 대한약리학회 1995 대한약리학잡지 Vol.31 No.2

Serotonergic neurons in brainstem play important roles in the endogenous descending pain inhibitory system. To illucidate the involvement of glutamate receptors in the regulation of brainstem serotonergic neurons, we studied the effects of glutamate receptor agonists on 5-hydroxytryptamine(5-HT) release from cultured neurons of rat fetal (gestational age 14th day) brainstem. Cultured cells maintained for 10 days in vitro were stimulated for 30 minutes with agonists of glutamate receptor subtypes at 10-1,000 micromolar concentration. Glutamate (10-1,000 M) increased 5-HT release in a concentration-dependent manner. N-methyl-D-aspartic acid $(NMDA)(10-1,000\;{\mu}M)$ increased 5-HT release in a concentration-dependent manner. Non-NMDA receptor agonists, kainate and $AMPA(3-1,000\;{\mu}M)$ also concentration-dependently increased 5-HT release. These results suggest that both NMDA and non-NMDA receptors regulate 5-HT release from brainstem serotonergic neurons. 뇌간의 세로트닌 신경계는 내재성 하행성 동통억제계(endogenous descending pain inhibitory system)에 있어서 중추적인 역할을 하고 있다. 뇌간의 세로토닌 신경세포에 대한 glutamate 수용체 중 N-methyl-D-aspartic acid-(NMDA-) 및 non-NMDA 수용체 효현제들의 작용을 알아보기 위하여, 쥐의 태자(태생 14일)로부터 뇌간을 분리하여 10일 동안 배양한 후 5-hydroxytryptamine(5-HT)의 분비에 대한 각 glutamate 수용체 효현제들이 영향을 연구하였다. Glutamate를 $10\;{\mu}M$에서 $1000\;{\mu}M$까지 농도를 변화하여 30분 동안 배지에 가한 후, 배지내에 분비되는 세로토닌을 측정한 결과, 농도 의존적으로 세로토닌의 분비가 증가되었다. Glutamate 수용체 중에서 NMDA 수용체 효현제인 NMDA를 $10\;{\mu}M$에서 $1000\;{\mu}M$까지 농도를 변화하여 30분 동안 배지에 가한 후, 배지내에 분비되는 세로토닌을 측정한 결과, 농도 의존적으로 세로토닌의 분비가 증가되었다. Non-NMDA 수용체 효현제인 kainate 및 AMPA를 $3\;{\mu}M$에서 $300\;{\mu}M$까지 농도를 변화하여 배지에 처리한 결과, 각 효현제에 의해 농도 의존적으로 세로토닌의 분비가 증가됨을 관찰하였다. 이상의 연구결과, 쥐의 태자(태생 14일)로부터 분리하여 10일동안 배양한 뇌간의 세로토닌 신경세포에 있어서 glutamate, NMDA, kainate 및 AMPA 모두 5-HT의 분비를 자극함으로써, NMDA- 및 non-NMDA 수용체 모두 5-HT의 분비에 관여하고 있음을 나타낸다.

생쥐에서 5-Hydroxytryptophan에 의한 설사에 대한 각종 전통 생약 추출물의 억제 효과

유재선,정전섭,이태희,손건호,서홍원,송동근,김영희,Yoo, Jae-Sun,Jung, Jun-Sub,Lee, Tae-Hee,Son, Kun-Ho,Suh, Hong-Won,Song, Dong-Keun,Kim, Yung-Hi 한국생약학회 1995 생약학회지 Vol.26 No.4

To find serotonin(5-hydroxytryptamine, 5-HT)-antagonizing activities in traditional herbal drugs, crude extracts from 66 kinds of traditional herbal drugs were randomly screened for inhibitory effects on 5-hydroxytryptophan(HTP)-induced diarrhea in mice. Intraperitoneal injection of 5-HTP(2.5 mg/kg) induced diarrhea in 92% of mice, when observed from 10 to 15 min after injection. Crude extracts(2 g/kg) from 66 kinds of traditional herbal drugs were orally pretreated for 1 h before 5-HTP injection. Of the 66 herbal drugs screened, Ephedrae Herba(麻黃), Cimicifugae Rhizoma(升麻), Anisi stellati Fructus(八角茴香), Aurantii Fructus(枳實), Polygalae Radix(遠志) showed the most potent inhibiting activities against 5-HTP(2.5 mg/kg)-induced diarrhea in mice. There are at least 3 possible mechanisms that would be responsible for the inhibitory effect of crude extracts on 5-HTP-induced diarrhea; 1) crude extract-induced inhibition of the activity of aromatic aminoacid decarboxylase catalyzing the conversion of 5-HTP to 5-HT, 2) crude extract-induced blockade of 5-HT receptor(s) in the gastrointestinal tract responsible for 5-HTP-induced diarrhea, 3) crude extract-induced inhibition of gastrointestinal activity, irrespective of 5-HT system. The exact mechanisms and molecules, responsible for the inhibitory effect of crude extracts on 5-HTP-induced diarrhea remain to be clarified.

Effect of Cholecystokinin on Serotonin Release from Cultured Neurons of Fetal Rat Medulla Oblongata

송동근,조현미,이태희,서홍원,김영희,Song Dong-Keun,Cho Hyun-Mi,Lee Tae-Hee,Suh Hong-Won,Kim Yung-Hi The Korean Society of Pharmacology 1995 대한약리학잡지 Vol.31 No.1

연수의 세로토닌 신경계는 내재성 하행성 동통 억제계 (endogenous descending pain inhibitory system) 에 있어서 중추적인 역할을 하고 있다. 연수의 세로토닌 신경세포에 대한 cholecystokinin (CCK) 및 second messenger systems에 작용하는 약물들의 작용을 알아보기 위하여, 쥐의 태자 (태생 14일) 로부터 연수를 분리하여 10동안 배양한 후 5-hydroxytryptamine (5-HT)의 분비에 대한 cholecystokinin (CCK) 및 second messenger systems에 작용하는 약물의 영향을 연구하였다. 배양 10일된 세포에 여러 neuropeptide들을 $10{\mu}M$ 농도로 48 시간동안 자극한 결과, CCK 와 substance P에 의하여 5-HT의 분비가 증가됨을 관찰하였다. Somatostatin, proctolin, thyrotropin releasing hormone, 및 interleukin-6 은 5-HT의 분비에 있어서 아무런 영향이 없었다. 어떠한 second messenger가 CCK에 의한 5-HT 분비에 연관되어 있나를 알아보기 위하여 calcium channel 봉쇄제인 nimodipine, 그리고 calmodulin 길항제인 calmidazolium의 영향을 살펴본 결과 nimodipine ($1{\mu}M$)은 거의 완전하게, 그리고 calmidazolium ($1{\mu}M$)은 부분적으로 유의하게 CCK에 의한 5-HT의 분비를 억제하였다. 또한 adenyl cyclase의 활성도를 높이는 forskolin ($5{\mu}M$)은 5-HT의 분비를 증가시켰지만 protein kinase C(PKC)를 활성화시키는 phorbol myristate acetate (PMA)는 $2{\mu}M$ 농도에서 5-HT의 분비에 아무런 영향을 미치지 아니하였다. 이상의 연구결과, calcium channel을 통한 calcium influx와 세포내 calmodulin이 CCK에 의한 5-HT분비 증가에 있어서 중요한 역할을 함을 제시한다. 또한, 5-HT의 분비에 있어서 cyclic AMP system이 중요한 역할을 하나, PKC system은 5-HT의 분비에 연관이 없음을 제시하고 있다. Serotonergic neurons in medulla oblongata play an important role in the endogenous descending pain inhibitory system. To illucidate the factors involved in the regulation of medullary serotonergic neurons, we studied the effects of cholecystokinin (CCK) and agents acting on various second messenger systems on 5-hydroxytryptamine (5-HT) release from cultured neurons of rat fetal (gestational age 14th day) medulla oblongata. Cultured cells maintained for 10 days in vitro were stimulated for 48 hours with CCK or other neuropeptides at 10 micromolar concentration. CCK ($10{\mu}M$) and substance P ($10{\mu}M$) significantly increased. 5-HT release. However, somatostatin, proctolin, thyrotropin releasing hormone, and interleukin-6 did not have any effects on 5-HT release. Nimodipine ($1{\mu}M$), a calcium channel blocker, almost completely, and calmidazolium ($1{\mu}M$), a calmodulin antagonist, significantly inhibited the CCK-induced 5-HT release. The total 5-HT content (intracellular 5-HT plus released 5-HT) was significantly increased by CCK. However, the intracellular 5-HT content was not significantly changed by CCK. Forskolin ($5{\mu}M$), an adenylate cyclase activiator, but not $2{\mu}M$ phorbol myristate acetate (PMA), a protein kinase C activator, significantly enhanced 5-HT release. The total 5-HT content (intracellular 5-HT plus released 5-HT) was significantly increased by forskolin. However, the intracellular 5-HT content was not significantly changed by forskolin. PMA had no effect on intracellular 5-HT levels. These results suggest that CCK regulates serotonergic neurons in the medulla oblongata by enhancing 5-HT secretion through calcium influx and caimodulin, and that cyclic AMP system but not protein kinase C system is involved in 5-HT release.

From The Shadow of Content Words

Gahyun Son(손가현),Hong Won Suh(서홍원) 한국영어학회 2014 영어학 Vol.14 No.2

연수 신경세포 배양에서 세로토닌 분비에 대한 Cholecystokinin의 작용

송동근(Dong-Keun Song),조현미(Hyun-Mi Cho),이태희(Tae-Hee Lee),서홍원(Hong-Won Suh),김영희(Yung-Hi Kim) 대한약리학회 1995 대한약리학잡지 Vol.31 No.1

연수의 세로토닌 신경계는 내재성 하행성 동통 억제계 (endogenous descending pain inhibitory system) 에 있어서 중추적인 역할을 하고 있다. 연수의 세로토닌 신경세포에 대한 cholecystokinin (CCK) 및 second messenger systems에 작용하는 약물들의 작용을 알아보기 위하여, 쥐의 태자 (태생 14일) 로부터 연수를 분리하여 10동안 배양한 후 5-hydroxytryptamine (5-HT)의 분비에 대한 cholecystokinin (CCK) 및 second messenger systems에 작용하는 약물의 영향을 연구하였다. 배양 10일된 세포에 여러 neuropeptide들을 10μM 농도로 48 시간동안 자극한 결과, CCK 와 substance P에 의하여 5-HT의 분비가 증가됨을 관찰하였다. Somatostatin, proctolin, thyrotropin releasing hormone, 및 interleukin-6 은 5-HT의 분비에 있어서 아무런 영향이 없었다. 어떠한 second messenger가 CCK에 의한 5-HT 분비에 연관되어 있나를 알아보기 위하여 calcium channel 봉쇄제인 nimodipine, 그리고 calmodulin 길항제인 calmidazolium의 영향을 살펴본 결과 nimodipine (1μM)은 거의 완전하게, 그리고 calmidazolium (1μM)은 부분적으로 유의하게 CCK에 의한 5-HT의 분비를 억제하였다. 또한 adenyl cyclase의 활성도를 높이는 forskolin (5μM)은 5-HT의 분비를 증가시켰지만 protein kinase C(PKC)를 활성화시키는 phorbol myristate acetate (PMA)는 2μM 농도에서 5-HT의 분비에 아무런 영향을 미치지 아니하였다. 이상의 연구결과, calcium channel을 통한 calcium influx와 세포내 calmodulin이 CCK에 의한 5-HT분비 증가에 있어서 중요한 역할을 함을 제시한다. 또한, 5-HT의 분비에 있어서 cyclic AMP system이 중요한 역할을 하나, PKC system은 5-HT의 분비에 연관이 없음을 제시하고 있다. Serotonergic neurons in medulla oblongata play an important role in the endogenous descending pain inhibitory system. To illucidate the factors involved in the regulation of medullary serotonergic neurons, we studied the effects of cholecystokinin (CCK) and agents acting on various second messenger systems on 5-hydroxytryptamine (5-HT) release from cultured neurons of rat fetal (gestational age 14th day) medulla oblongata. Cultured cells maintained for 10 days in vitro were stimulated for 48 hours with CCK or other neuropeptides at 10 micromolar concentration. CCK (10μM) and substance P (10μM) significantly increased. 5-HT release. However, somatostatin, proctolin, thyrotropin releasing hormone, and interleukin-6 did not have any effects on 5-HT release. Nimodipine (1μM), a calcium channel blocker, almost completely, and calmidazolium (1μM), a calmodulin antagonist, significantly inhibited the CCK-induced 5-HT release. The total 5-HT content (intracellular 5-HT plus released 5-HT) was significantly increased by CCK. However, the intracellular 5-HT content was not significantly changed by CCK. Forskolin (5μM), an adenylate cyclase activiator, but not 2μM phorbol myristate acetate (PMA), a protein kinase C activator, significantly enhanced 5-HT release. The total 5-HT content (intracellular 5-HT plus released 5-HT) was significantly increased by forskolin. However, the intracellular 5-HT content was not significantly changed by forskolin. PMA had no effect on intracellular 5-HT levels. These results suggest that CCK regulates serotonergic neurons in the medulla oblongata by enhancing 5-HT secretion through calcium influx and caimodulin, and that cyclic AMP system but not protein kinase C system is involved in 5-HT release.