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- 저자 : 노현모 ( Tae Kook Kim (검색결과 3 건)
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Factors Affecting the Maintenance of Hybrid $2{\mu}m$ Circle-Based Plasmids
김태국,최철용,노현모,Kim, Tae-Kook,Choi, Cheol-Yong,Rho, Hyune-Mo 생화학분자생물학회 1989 한국생화학회지 Vol.22 No.2
효모내에 자연적으로 존재하는 $2{\mu}m$ plasmid를 이용하여 여러 유전자 운반체를 재조합하였다. 만든 유전자 운반체들의 기능을 알기 위하여 형질 전환력, 안정도, 복제수 그리고 외래 유전자로써 HBsAg 유전자의 발현 정도를 효모 균주 SHY4 $(cir^+)$와 NNY1 $(cir^0)$에서 비교 조사하였다. 조사 결과를 정리해보면, 첫째, $2{\mu}m$ plasmid DNA를 전부 가지는 유전자 운반체가 일부만 가지는 것보다 안정도와 복제수가 높다. 둘째, $2{\mu}m$ plasmid의 A 또는 B 형태는 복제에 별다른 영향을 미치지 않는다. 세째, ADH I 유전자의 promoter로부터의 강한 전사는 재조합된 유전자 운반체의 복제에 영향을 미치지 않는다. 네째, bacterial sequences가 제외된 새로운 유형의 유전자 발현 운반체가 가장 높은 정도로 HBsAg를 세포내에 $2{\mu}m$ plasmid가 없는 효모 균주 NNY1 $(cir^0)$에서 발현시킨다. The replication functions associated with yeast $2{\mu}m$ plasmid were investigated. We constructed various vectors from $2{\mu}m$ plasmid and analyzed their transformation efficiency, stability, copy number and expression of hepatitis B viral surface antigen gene as a foreign gene in $(cir^+)$ and $(cir^0)$ yeast strains. The results showed that (i) plasmid containing complete $2{\mu}m$ circle genome showed higher stability and copy number than vector containing the segment of $2{\mu}m$ circle; (ii) plasmid derived from $2{\mu}m$ plasmid of A or B form showed similar stability and copy number irrespective of orientation of unique regions; (iii) expression from alcohol dehydrogenase I gene promoter in $2{\mu}m$ plasmid did not affect the replication of constructed plasmids; (iv) $2{\mu}m$-based plasmid without bacterial sequences showed higher stability and copy number than chimeric plasmid, and expressed higher hepatitis B viral surface antigen gene in $(cir^0)$ yeast strain which does not contain $2{\mu}m$ plasmid.
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효모내에 존재하는 2 μm Circle - Based Plasmids
김태국,최철용,노현모 ( Tae Kook Kim,Cheol Yong Choi,Hyune Mo Rho ) 생화학분자생물학회 1989 BMB Reports Vol.22 No.2
The replication functions associated with yeast 2㎛ plasmid were investigated. We constructed various vectors from 2㎛ plasmid and analyzed their transformation efficiency, stability, copy number and expression of hepatitis B viral surface antigen gene as a foreign gene in (cir^+) and (cir^0) yeast strains. The results showed that (i) plasmid containing complete 2㎛ circle genome showed higher stability and copy number than vector containing the segment of 2㎛ circle; (ii) plasmid derived from 2㎛ plasmid of A or B form showed similar stability and copy number irrespective of orientation of unique regions; (iii) eypression from alcohol dehydrogenase I gene promoter in 2㎛ plasmid did not affect the replication of constructed plasmids; (iv) 2㎛-based plasmid without bacterial sequences showed higher stability and copy number than chimeric plasmid, and expressed higher hepatitis B viral surface antigen gene in (cir^0) yeast strain which does not contain 2㎛ plasmid.
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