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효소면역측정법에 의한 국내산 된장과 고추장 중 Aflatoxin B1의 오염도 조사
배수익,곽보연,박윤경,김영호,손동화,Bae, Soo-Ick,Kwak, Bo-Yeon,Park, Yun-Kyung,Kim, Young-Ho,Shon, Dong-Hwa 한국식품위생안전성학회 2003 한국식품위생안전성학회지 Vol.18 No.3
된장과 고추장에 대해 cdELISA에 의한 $AFB_1$의 분석방법을 확립하고 국내에서 생산되는 재래식 및 개량식 된장과 고추자을 수거하여 $AFB_1$의 오염도를 조사하였다. 표준곡선을 작성하였을 때, 이의 검출 한계는 0.2 ng/m(ppb)이었다. 된장의 Spike test 후 회수율은 1~100 ng/g 범위에서 평균 71.5%로 나타나 이 범위에서 cdELISA에 의한 $AFB_1$의 측정이 가능함을 보여주었다. 이로부터 된장 및 고추장에서 cdELISA를 통한 $AFB_1$의 분석 방법을 확립하였다. 된장 및 고추장 시료의 $AFB_1$의 오염도는 총 30종의 고추장 시료에서는 $AFB_1$이 검출되지 않았고 총 30종의 된장 시료 중 6종에서 1.0~6.0 ng/g 수준으로 검출되었다. 이는 우리 나라의 허용 기준인 10 ng/g(ppb) 이하였다. Competitive direct enzyme-linked immunosorbent assay(cdELISA) of aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$) in deonjang(Korean-style soybean paste) and kochujang(fermented hot peppersoybean paste) and the level of $AFB_1$ in modern or traditional style deonjang and gochujang, produced in Korea, was surveyed by cdELISA. From the standard curve of the cdELISA, the detection limit of $AFB_1$ was 0.2 ng/m/. The average recovery of $AFB_1$ was 71.5% in the range of 1~100 ng/g after spiking $AFB_1$ into deonjang and it means that it could be possible to detect the $AFB_1$ in these range by the cdELISA in deonjang. Among the 30 kochujangs tested, no $AFB_1$ was detected in kochujangs. Among the 30 deonjangs, $AFB_1$ was detected in 6 ones in the range of 1.0~6.0 ng/g. The occurrence of $AFB_1$ in deonjang and kochujang tested in this study was less than the Korea Standard and Specification of aflatoxin in foods (10 ppb).
인축의 뇨 중 aflatoxin M<SUB>1</SUB>의 오염분석 및 위해서 평가의 오염분석 및 위해성 평가
김현정(Hyun-Jung Kim),곽보연(Bo-Yeon Kwak),손동화(Dong-Hwa Shon) 한국식품과학회 2009 한국식품과학회지 Vol.41 No.2
AFB<SUB>1</SUB>의 대사산물 중 하나인 AFM<SUB>1</SUB>을 사람과 돼지의 뇨에서 cdELISA를 통해 분석함으로써 간접적으로 AFB<SUB>1</SUB>의 위해성 평가를 수행하고자 하였다. 항 AFM<SUB>1</SUB> 항체와 AFB<SUB>1</SUB>-HRP를 이용한 cdELISA에서 AFM<SUB>1</SUB>의 검출한계는 10 pg/mL로 나타났다. 사람의 요에 AFM<SUB>1</SUB>을 3-100 pg/mL 농도가 되게 첨가한 후 cdELISA로 분석하였을 때 그 회수율은 117-167%(평균 139±19.1)의 범위로 나타났다. 사람의 뇨 중 AFM<SUB>1</SUB>의 오염량을 cdELISA로 분석한 결과 전체 172개의 시료 중 165개의 시료에서 평균 2.74±1.89 pg/mL 농도로 검출되었다. 뇨 중 AFM<SUB>1</SUB>의 일일배출량은 평균 3.97 ng/day으로 나타났고, AFB<SUB>1</SUB>의 섭취량은 체내전환율 5%로 가정하였을 때, 79.4 ng/day로 추정되었다. 따라서 사람의 일일섭취추정량(PDI)은 1.28 ng/kg.bw/day로 나타났으며 돼지의 PDI는 9.2 ng/kg. bw/day로 나타났다. 한편 AFB<SUB>1</SUB> 섭취의 위해성 평가에서 사람의 PDI는, 일일섭취감내량(TDI, 0.15 ng/kg.bw/day)보다 8.5배나 높은 값을 보였지만 외국의 연구결과와 비교하였을 때 대체로 비슷하게 나타났다. To conduct a risk assessment of AFB<SUB>1</SUB> intake, AFM<SUB>1</SUB>, which is a metabolite of AFB<SUB>1</SUB> in the human and porcine urine, was determined by competitive direct ELISA (cdELISA). The detection limit of cdELISA using anti-AFM<SUB>1</SUB> antibody and AFB<SUB>1</SUB>-HRP conjugate was 10 pg/mL. The recoveries of AFM<SUB>1</SUB> were 117-167% after the addition of AFM<SUB>1</SUB> in the human urine in a range of 3-100 pg/mL. 165 samples (95.5%) of those obtained from 172 persons evidenced measurable levels of urinary AFM<SUB>1</SUB>. The detected AFM<SUB>1</SUB> ranges were 0-11.6 pg/mL and the average level of AFM1 contamination was 2.74±1.89 pg/mL. The estimated amount of AFM<SUB>1</SUB> excretion in the human urine was 3.97 ng/day and the estimated AFB<SUB>1</SUB> intake amount was 79.4 ng/day. The probable daily intake (PDI) of AFB<SUB>1</SUB> by the subjects was estimated to be 1.28 ng/kg.bw/day, which was higher than the tolerable daily intake (TDI, 0.15 ng/kg.bw/day). In the case of porcine urine, the AFM<SUB>1</SUB> ranged between 0.97-26.7 pg/mL and the average contaminated AFM<SUB>1</SUB> was 10.62±4.39 pg/mL. The estimated amount of AFM<SUB>1</SUB> excretion in the porcine urine was 27.6 ng/day, and the estimated AFB<SUB>1</SUB> intake amount was 551 ng/day.
곽보연,이기환,정한승 한국식품영양학회 1997 韓國食品營養學會誌 Vol.10 No.2
사람의 미토콘드리아에 있는 aldehyde dehydrogenase(ALDH2)는 체내에서 알코올 대사 과정 중에 생성되는 아세트알데히드를 산화시키는 주된 역할을 담당하고 있다. 이 ALDH2가 알코올 대사에 미치는 영향을 연구하기 위하여 가용화된 효소가 팔요하다. 알려져 있는 유전자의 염기서열 데이터를 바탕으로 ALDH2의 cDNA는 cDNA 라이브러리에서 선별하였으며, 이를 여러 가지 대장균 발현벡터에 연결하였다. 제조한 발현벡터를 형질전화시킨 대장균을 사용하여 단백질의 발현을 확인한 결과 대부분의 계에서 ALDH가 과발현되고 있었다. 그러나 발현된 단백질의 대부분은 inclusion body로 형성되어, 실제로 가용화된 효소의 양은 전체 발현된 양의 5% 이하였고 이들 몇 가지 발현 system으로 재조합 ALDH2의 발현을 확인하였다. Human mitochondrial aldehyde dehydrogenase(ALDH2) is mainly responsible for the oxidation of acetaldehyde generated during alcohol oxidation in vivo. To investigate the role of ALDH2 in alcohol metabolism, it was needed to get solubilized enzyme. The cDNA of ALDH2 is isolated from cDNA library and ligated to several expression vectors for E. coli. At almost expression system to be constructed, the broad expression band of ALDH2 was detected. But, the large part of the expressed protein consisted as inclusion body, the yield of solubilized enzyme was not more than 5% of the total expressed amount. Recombinant ALDH2 was verified from the several expression systems.