참개구리 배아를 이용한 화학물질의 독성평가 연구

고선근 ( Sun Kun Ko ) 한국환경생물학회 2012 환경생물 : 환경생물학회지 Vol.30 No.3

Toxicity of Ni2+ and Tebuconazole were investigated via FETAX (Frog Embryo Teratogenesis Assay-Xenopus) protocol using domestic frog embryos. Embryos of Black-spotted pond frog, Rana nigromaculata, were incubated and toxic effects of Ni2+ and Tebuconazole were investigated by probit analysis. As a result, mortality and malformation rates were increased and larval body length was decreased in a dose dependant manner of Ni2+ and Tebuconazole. The half maximal effective concentration (EC50) of Ni2+ and Tebuconazole were 0.07, 12.7 mg L-1, respectively and the half maximal lethal concentration (LC50) of Ni2+ and Tebuconazole were 4.2, 39.1, respectively. The teratogenic index (TI) were 61.4 in Ni2+ and 3.1 in Tebuconazole, respectively. These results reveals that Ni2+ and Tebuconazole suppress the development of Black-spotted pond frog embryos at the low concentration as showing teratogenic effects in other assay system. Therefore, teratogen assay system using the Rana nigromaculata embryos could be useful as a tool to evaluate the toxicity of the pollutants in environment.

PCB가 산개구리의 난자성숙과 프로제스테론 생성에 미치는 영향

고선근 ( Sun Kun Ko ),이두표 ( Doo Pyo Lee ) 한국환경생태학회 2003 한국환경생태학회지 Vol.17 No.1

살균제 Tebuconazole이 한국산 개구리류(두꺼비, 청개구리, 참개구리) 배아 발달에 미치는 영향

이해범,고선근,Lee, Hae-Bum,Ko, Sun-Kun 한국환경생물학회 2021 환경생물 : 환경생물학회지 Vol.39 No.3

In this experiment, we investigated the toxicity of tebuconazole (fungicide) using domestic frog embryos, along the FETAX (Frog Embryo Teratogenesis Assay-Xenopus) protocol. Bufo gargarizans, Hyla japonica, and Pelophylax nigromaculatus embryos were incubated, and investigation of the tebuconazole effect was performed by the probit analysis. As a result, depending on the concentrations of tebuconazole, the mortality and malformation rates were increased and larval body length was decreased. The teratogenic concentrations (EC₅₀) of tebuconazole were 34.4mg L^-1, 10.6mg L^-1, and 14.9mg L^-1, respectively, and the embryo lethal concentrations(LC₅₀) of tebuconazole were 74.7 mg L^-1, 38.5 mg L^-1, and 39.1 mg L^-1, respectively. The teratogenic index (TI) valuesof tebuconazole were 2.19, 3.58, and 2.65; thus, it showed teratogenicity in embryonic development of these three frogs. These results revealed that in this experiment, tebuconazole suppressed the development of embryos at a relatively low concentration. In addition, mortality, malformation ratios, malformation patterns, and growth rates were similar to the results from the other assay systems. Therefore, tebuconazole was thought to have an effect on the embryo development of domestic frogs. In future, it will be necessary to identify species specificity in order to the clarify the causes of differences in mortality, malformation rate, and malformation patterns depending on the species.

참개구리 생식주기에 관한 연구

고선근 호남대학교산업기술연구소 1997 산업기술연구논문집 Vol.4 No.-

참개구리(Rana nigromaculata)의 번식주기를 조사하기 위해 암.수 개체를 채집하여 생식소무게와 gonadosomatic index(GSI) 및 생식세포의 변화 양상을 연중 조사하였다. 생식소의 무게와 GSI는 정소내의 생식세포 증식 및 난소내 여포난자의 성장에 따른 크기에 비례하여 변화하는 양상을 나타내었다. 이들 개구리의 정자형성과 난자의 성장은 6월∼7월에 시작되어져 8월∼9월에 가장 활발하게 진행되었으며 10월부터 동면기에는 수컷들의 완성된 정자 이동현상(spermiation)이 진행되고 암컷들은 2월부터 성장이 거의 완료된 난자들은 간직하다가 5월에 암.수 개체에서 각각 난자와 정자를 배출하여 번식을 시작하는 생식주기를 나타내었다. The present experiments were carried out to investigate the reproductive cycle of Rana nigromaculata. Reproductive cycle was investigated by examing seasonal changes in gonade weight, gonadosomatic index(GSI), germ cell developmental stages. Gonade weight and GSI in this frogs varied among different season, they were increased rapidly in Setember. On the basis of gonadal histology, gonadal cycle was divisible into each period, spermatogenesis(June-Apr.), spermiation(Nov-May), post-spawning (May) in male frog and ClassⅠ(May-June), ClassⅡ(May-Aug.), ClassⅢ(Aug-Jan.), ClassⅣ(Sep-Jan), ClassⅤ(Fan-May) developmental stages in female frog. Analyzing of gematogenic cycle indicated that breeding season of this frog is May.

살균제 Benomyl이 청개구리 배아발달에 미치는 영향

고선근 호남대학교 산업기술연구소 2013 녹색산업연구 Vol.19 No.2

살균제 benomyl이 청개구리 배아발달에 미치는 영향을 파악하기 위해 FETAX(Frog Embryo Teratogenesis Assay-Xenopus) 기법에 따라 청개구리(Hyla japonica)의 배아를 배양하면서 benomyl을 처리하여 치사율과 기형율, 기형양상, 성장에 미치는 영향을 조사하여 그 효과를 probit 분석법으로 조사하였다. 그 결과, benomyl의 농도에 의존하여 유생의 체장의 성장을 억제하고 치사율과 기형율은 증가하였다. benomyl에 의한 teratogenic concentration(EC50)은 0.68mg/ℓ을 나타내었고 embryo lethal concentrations(LC50)은 2.59mg/ℓ을 나타내었으며 Teratogenic Index(TI=LC50/EC50)는 3.81을 나타내었다. 이상의 결과들로 보아 benomyl은 청개구리 배아발달에 최기형성 물질로 작용함을 알 수 있었다. In order to determine the effect of benomyl, which is fungicide, on the development of tree frog(Hyla japonica) embryos, tree frog embryos were developed according to the FETAX (Frog Embryo Teratogenesis Assay-Xenopus) protocol, and then benomyl was applied to investigate the mortality and malformation rates, deformation aspect and effect of benomyl on the growth, and the effect of benomyl was investigated using the probit analysis. As a result, the development of larval body length was suppressed depending on the concentration of benomyl, and mortality and malformation rates increased. The teratogenic concentration(EC50) by benomyl was 0.68mg/ℓ, the embryo lethal concentrations(LC50) was 2.59mg/ℓ, and the Teratogenic Index(TI=LC50/EC50) was 3.81. The results above show that benomyl acts as a teratogenic agent in the development of tree frog embryo.

살균제 Benomyl이 무당개구리의 배아발달에 미치는 영향

고선근 호남대학교산업기술연구소 2011 산업기술연구논문집 Vol.17 No.-

본 연구는 Benomyl이 무당개구리의 배아발달에 미치는 영향을 파악하기 위해 배양중인 배아에 Benomyl의 농도별로 독성을 조사하였다. 그 결과 Benomyl은 100ppm의 농도에서 100%의 사망률을 나타내었으며 1ppm에서 40%의 사망률을 나타내었다. 기형은 0.01ppm에서부터 7.1%의 비율로 나타내기 시작하였으며 꼬리기형(51.8%), profound형(33.9%), 복부기형(8.9%), 척추기형(3.6%), 수포형성기형(1.8%)등을 나타냈다. 이러한 결과들은 살균제인 Benomyl이 무당개구리의 배아 및 유생의 발달과정을 강력히 저해함을 의미한다. This study investigated the toxic effects of Benomyl on Oriental fire bellied toad (Bombina orientalis) by determining development embryos exposed at different concentrations. The results shown that all embryo were dead rate in the concentration of 100ppm and 40% of embryos were dead rate in 1ppm of benomyl. Benomyl manifested 6.7% mortality rate and 7.1% malformation rate in 0.01ppm, and specific malformation occurred in (flexure of) the tail (abnormality)(51.8%), profound abnormality(33.9%), abdominal abnormality(8.9%), spine abnormality(3.6%) and edema abnormality(1.8%). These results suggests that the fungicide benomyl inhibit strongly to the embryonic and larval development of Bombina orientalis.

팔영산의 양서·파충류

고선근 호남대학교산업기술연구소 2009 산업기술연구논문집 Vol.15 No.-

The survey on the Amphibians and the Reptiles was carried out the region of Mt. Palyeong during March 2005 to August 2005. The result was as follows 1. Amphibia observed at Mt. Palyeong around regions were classified 2 Orders, 5 Families, 8 Species and Reptiles were 2 Orders, 5 Families, 9 Species. 2. The confirmed Amphibians were 2 Orders, 5 Families, 8 Species Hynobius leechii, Bombina orientalis, Bufo gargarizans, Hyla japonica, Rana nigromaculata, Rana dybowskii Rana rugosa and Rana catesbeiana. 3. The collected and observed Reptiles were 2 Orders, 5 Families, 9 Species Pelodiscus sinensis, Scincella vandenburghi, Takydromus amurensis, Takydromus wolteri , Rhabdophis tigrinus, Amphiesma vibakari ruthveni, Gloydius ussuriensis, Glovdius brevicaudus and Glovdius saxatilis. 팔영산 일대에서 서식중인 양서류와 파충류를 2005년 3월부터 8월까지 조사하였다. 양서류는 2목 5과 8종이, 파충류는 2목5과9종이 확인되었다. 본 조사지역에서 관찰된 양서류는 도롱농, 무당개구리, 두꺼비, 청개구리, 참개구리, 북방산개구리, 옴개구리, 황소개구리 등 2목5과8종이었으며 파충류는 자라, 도마뱀, 아무르장지뱀, 줄장지뱀, 유혈목이, 대륙유혈목이, 쇠살모사, 살모사, 까치살모사 등 2목5과9종이었다.

북방산개구리 정소주기에 따른 간질세포 변화와 테스토스테론 생성에 관한 연구

고선근 호남대학교 산업기술연구소 1997 산업기술연구논문집 Vol.5 No.-

북방산개구리 성체 수컷을 연중 채집하여 정소내 간질세포(interstitial cell)의 수와 핵의 크기, 미세구조 변화를 조사하였으며 아울러 정소내 testosterone양의 변화 및 뇌하수체 추출물의 자극에 의한 생성 양상을 조사하였다. 간질세포는 개구리의 활동기 보다 동면기에 세포수도 많았고 핵의 크기도 훨씬 컸으며 이러한 현상은 정소내에 testosterone 농도가 높아지는 시기와 일치하였다. 간질세포의 미세구조도 활동기에는 극히 소수의 미토콘드리아 및 조면소포체 만을 가졌으나 동면기에는 이들의 수도 늘었고 활면소포체, 골지체, 지질과립 등이 출현하였다. 정소의 뇌하수체 추출물에 대한 반응성(responsiveness)도 개구리의 활동기에는 거의 나타나지 않다가 동면기에 급격히 증가하여 간질세포 미세구조의 변화와 거의 같은 시기에 나타났다. 이러한 현상들로 보아 정소내 testosterone의 양적 변화는 간질세포의 구조변화와 뇌하수체의 활성에 의해 조절될 것으로 추정된다. The experiments were carried out to investigate renewal of the intersititial cell and the production of testosterone by testicular cycle in the frog, Rana dybowskii. The interstitial cell revewal was examined by focussing morphology of intra-testis. The changes in production of the testis were assessed by measuring testosterone in culture media and testis by radioimmunoassay. The size of nucleus was bigger and the number of interstital cells were higher in hibernation periods than active ones. The interstital cells in December exhibited the ultrastructure of steroid secreting cells. Only testis collected in winter secreted testosterone in response to frogs pituiary homogenate(FPH) during in vitro culture. It seems likely that changes of the interstitial cells and hypothalanus-hypophyseal activity play an important role in regulated the hormonal response in frog testis.

옴개구리 생식주기에 관한 연구

고선근 湖南大學校 1997 호남대학교 학술논문집 Vol.18 No.2

옴개구리(Rana rugosa)의 생식주기를 조사하기 위해 암.수 개체를 연중 채집하여 생식소 무게와 gonadosomatic index(GSI) 및 생식세포들의 변화양상을 조사하였다. 수컷의 생식소 무게와 GSI는 정소내의 생식세포 증식양상에 관계없이 연중 일정하였으며 암컷의 난소무게와 GSI는 3월부터 8월까지 낮게 존재하여 여포난자의 성장에 따른 크기 변화에 비례하여 변화하는 양상을 나타내었다. 이들 개구리의 정자형성은 6월에 시작되어 7∼8월에 가장 활발히 진행되었으며 9월에는 일부의 세정관에서 정자이동현상(spermiation)이 진행되고 3월부터 정자배출이후 단계의 세정관들이 다수 출현하였다. 난소내에서는 연중 Class Ⅰ, Ⅱ상태의 난자들이 관찰되었으며 3월부터는 성장이 거의 완료된 난자들이 존재하여 옴개구리는 3월부터 7월까지 암.수 개체에서 각각 난자와 정자를 배출하여 번식을 하는 생식주기를 나타내었다. The present experiments were carried out to investigate the reproductive cycle of Rana rugosa. Reproductive cycle was investigated by examing seasonal changes in gonade weight, gonadosomatic index(GSI), germ cell developmental stages. No significant changes of testis weight and GSI were observed throughtout the year. Ovary weight and GSI were lower in March∼August then in other seasons. On the basis of gonadal histology, gonadal cycle was divisible into each period. Spermatogenesis(July∼Mar.), spermiation(Sep.∼May), post-spawning (Feb.∼July) in male frog and ClassⅠ(year round), ClassⅡ(year round), ClassⅢ(Apr.∼Nov.)., ClassⅣ(Aug.∼Apr.), ClassⅤ(Mar.∼July) developmental stages in female frog. Analyzing of gematogenic cycle indicated that breeding of this frog appeared to occur during March∼July.

무등산의 양서ㆍ파충류

고선근 호남대학교 산업기술연구소 2001 산업기술연구논문집 Vol.9 No.-

무등산에 서식중인 양서류와 파충류를 2000년 4월부터 10월까지 조사하였다. 양서류는 2목 5과 9종이 파충류는 2목 4과 7종이 관찰되었다. 양서류 중 청개구리, 참개구리, 산개구리와 파충류 중 누룩뱀, 유혈목이는 조사지역에서 모두 관찰되었다. 관찰되어진 16종의 양서 파충류는 도롱뇽, 무당개구리, 두꺼비, 청개구리, 참개구리, 옴개구리, 산개구리, 아므르산개구리, 황소개구리, 도마뱀, 누룩뱀, 무자치, 유혈목이, 능구렁이, 쇠살모사, 살모사 등이며 양서류 중 특히 도롱뇽, 두꺼비, 산개구리와 파충류의 모든 종들은 보호가 요구되어진다. The surveys of Amphibians and Reptiles were carried out the region of Mt. Mudeung during April~Octobr 2000. Amphibian specimans observed were classfied 2 Orders, 5 Families, 9 Species and Reptiles were 2 Orders, 4 Families, 7 Species. Among Amphibians Hyla japonica, Rana nigromaculata, Rana dybowskii were commonly inhabited in these areas. On the other hand, in case of Retila, Elaphe dione, Rhabdophis tigrinus tigrinus were common. Specified wildlife species in these areas were totally 16 species such as Hynobius leechii, Bombina orientalis, Bufo bufo gargarizans, Hala japonica, Rana nigromaculata, Rana rugosa, Rana dybowskii, Rana amurensis, Rana catesbeiana, Scincella laterale laterale, Elaphe dione, Elaphe rufodorsata, Rhabdophis tigrinus tigrinus, Dinodon rufozonatus rufozonatus, Agkistoddon ussuriensis, and Agkistoddon brevicaudus. It is required to conserve the Amphibian fauna especially Hynobius leechii. Bufo bufo gargarizans, and Rana dybowskii and all of the Retilian.