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Novel function of Bax gene in drug addiction by methamphetamine
류나경 Department of Biology Education Graduate School of 2005 국내석사
Methamphetamine is an illicit drug of abuse that can cause neuropsychiatric and neurotoxic damage. Repeated administration of psychostimulants such as methamphetamine induces a behavioral sensitization, According to the previous study, Bax was involved in neurotoxicity by methamphetamine. but the function of Bax in drug addiction is not clear yet. So we have studied the function of Bax in drug addiction. In present study we treated chronic methamphetamine in Bax deficient mouse model. and examined behavioral change using CPP test. CPP score in Bax KO was decreased than that of WT mice. Therefore, we had screened Bax related genes that involved in drug addiction using microarray. In order to confirm microarray data, We applied RT-PCR method to observe relative change of Bcl2, pro-apoptotic family gene. As a result, To experiment microarray we selected genes connected with Bax in microarray data. Though microarray data we selected Tgfbr2 gene. Tgfbr2 gene was decreased by methamphetamine in Bax KO mouse and overexpressed in Bax WT mouse. Additionally, we confirmed about Creb, FosB and c-Fos were related to drug addiction and Bax using immunohistochemistry. Methamphetamine은 남용으로 neuropsychiatric와 neurotoxic 피해의 원인이 될 수 있는 불법 약물이다. methamphetamine이 정신자극이 계속되면 행동 증감을 야기하게 된다. 사전연구에 의하면, methamphetamine에 의한 neurotoxicity에 Bax gene이 관련이 있다. 그러나 drug addiction에 있어서 Bax의 기능은 아직 명확하지 않다. 따라서 본 연구는 drug addiction에 관여하는 Bax의 기능을 알아보려 한다. 이를 위해 Bax KO과 WT mice에 methamphetamine을 chronic하게 처리하였다. Bax gene을 선택하게 된 것은 rat brain에서 Bax가 증가하는 것을 확인하고 이 결과를 바탕으로 methamphetamine이 mouse에서도 rat과 유사하게 영향을 미칠 것이라고 예상했다. CPP test를 통해 mouse의 behavioral change인 CPP score가 Bax KO에서 WT보다 현저히 감소하는 것을 볼 수 있었다. 이 CPP test 결과를 immunohistochemistry 확인하고 brain에서 drug addiction에 중요한 부분인 striatum 부분에 발현을 보았다. 그중 pro-apoptotic인 Bad, Bid를 RT-PCR로 확인한 후 이 결과를 바탕으로 우리는 methamphetamine이 처리된 Bax WT과 KO을 microarray하였다. microarray를 통해 Bax와 관련된 Tgfbr2라는 gene을 선택하고 Bax KO에서 감소하는 것을 RT-PCR과 immunohistochemistry로 확인하였다. 또한 Bax와 drug addiction에 관여하는 transcription factor인 Creb, FosB, c-Fos 발현을 immunohistochemistry로 확인하여 Bax와의 연관성을 보았다.
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