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가토안에 삽입된 Ahmed방수유출장치에서 방수의 유출이 술 후 여과포의 조직화학적인 변화에 미치는 영향
목적: 난치성 녹내장환자에 주로 사용되는 방수유출장치는 전방에 삽입된 실리콘관을 통해 방수가 유출되어 안구 적도부 후방에 위치한 본체에서 여과포를 형성하여 안압을 조절하게 된다, 이렇게 형성된 후여과포는 일반적인 성유주절제술 후 윤부에 형성되는 여과포와는 달리 결막이 두껍고 테논낭이 풍부한 안구 적도부 뒤쪽에 위치하며 방수유출장치의 본체와 테논낭 사이에 형성되는 점을 볼 때, 후여과포로의 지속적인 방수 유출이 여과포의 투과성, 여과포의 두께, 세포밀도, 섬유아세포의 증식정도에 어떠한 영향을 미치는가에 대해 알려진 바가 없다. 저자는 동물실험을 통해 후여과포로의 여러 가지 양상의 방수유출 모델을 만든 후 각각의 모델의 양상에 따른 후여과포의 조직학적 변화를 분석하여 방수의 유출이 후여과포의 투과성에 어떠한 영향을 주는지 알아보고자 하였다. 방법: 이전에 안약 및 수술을 시행한 적이 없는 정상적인 안구를 가진 약 1.5에서 2.5 Kg의 New Zealand산 백색의 가토 12마리를 각각 4마리씩 A, B, C 세군으로 나누어 한쪽안에 녹내장 여과장치의 일종인 Ahmed 방수유출장치(Model AGV-S1, New World Medical Co. USA) 녹내장 장치를 무균적으로 결막하에 수술로 삽입하였으며, A군은 Ahmed 방수유출장치의 본체를 테논낭 하에 삽입한 후 본체와 연결된 실리콘관을 전방내 삽입하지 않은 상태에서 8-0 vicryl로 결막을 연속 봉합하여 후여과포내로 방수의 유출이 없게 하였고, B군과 C군에서는 실리콘관은 전방내에 2-3 mm정도 유지되도록 전방내로 삽입하였다. C군은 전방과 본체사이의 공막에 노출되어 있는 실리콘관을 5-0 prolene과 항께 8-0 prolene으로 결찰하여 후여과포내로의 방수의 유출이 되지 않도록 하였지만 술 후 5-0 prolene을 제거할 경우 방수의 유출이 가능하게 하였으며, B군은 수술직후부터 정상적인 방수의 유출이 가능하게 하였다. 술 후에 항생제와 스테로이드 정안약을 1일 2회 점안하였으며, 추가로 안압약은 사용하지 않았다. 술 후 1주일간격으로 안압 및 전안부 검사와 후여과포 형성 및 안구상태를 관찰하여 감염 및 실리콘관의 위치 등을 검사하였다. 술 후 4주후 C군의 prolene을 제거하였으며 술 후 16주후에 방수유출장치에 의해 형성된 후여과포의 조직학적 소견을 알기 위해 A, B, C군의 가토를 희생시킨 후 안구적출을 시행하고 10% 포르말린용액에 24시간 보관 후 각 표본의 후여과포 부위를 절제하고 Hematoxylin & Eosin (H&E) 염색, 면역조직화학 염색 후 광학 현미경적인 조직소견, Collagen 염색소견, 전자현미경 소견을 관찰하였다. 결과: 술 전과 술 후의 안압을 비교하면, B군과 C군은 후여과포내 방수가 유입된 후 안압이 하강되었으며, 조직학적 소견에서 A군은 술 후 내벽의 교원질섬유의 증식과 외벽에서 염증세포와 혈관조직이 관찰되었으며, C군은 술 후 초기에는 B군보다는 내벽에서 교원질섬유의 구조가 더 조밀하였으나 술 후 16주에는 두군이 비슷한 후여과포의 조직양상을 보였다. B군과 C군은 A군에 비하여 염증세포 및 섬유모세포의 수가 감소하였고 교원질섬유층의 간격이 증가되며 미세낭포가 관찰되었다. 결론: 저자는 가토에 Ahmed 방수유출장치를 삽입 후, 방수의 유입 유무와 시기를 달리함에 따른 방수에 의한 후여과포의 변화를 알 수 있었다. 후여과포 내로 방수의 유출은 성유모세포의 증식을 억제하고 교원질섬유의 낭성구조 발생을 자극함을 알 수 있었다. Background: An Ahmed glaucoma valve for poor controlled glaucoma regulates intraocular pressure with a filtering bleb which is formed at the body of the posterior equator by the aqueous humor through the valve from anterior chamber. This posterior bleb locates posteriorly to the equator in which the conjunctiva and Tenon's layer are more abundant between the body of the valve and tenon's layer. There had been no report about the influence of aqueous humor to bleb, histologically; bleb filteration, thickness, cell density, proliferation of fibroblasts. Author studied the histologic changes of posterior filtering blebs on experimental models with rabbits. Materials & Methods: Ahmed glaucoma valve was implanted to normal 12 rabbits from 1.5 kg to 2.5 kg without previous operation history. Ahmed glaucoma valve (Model AGV-S1, New World Medical Co. USA) was implanted under the conjunctiva by operation with aseptic procedures. In 4 of 12 rabbits(group A), the tube of Ahmed glaucoma valve was not inserted into the anterior chamber. In other 4 rabbits, the conjunctiva was closed after the tube was inserted into the anterior chamber (group B). In another 4 rabbits, 5-0 prolene ligation was done around the Ahmed S1 implant tube, then tube was inserted in the anterior chamber. After 4 weeks, tube ligation was removed (group C). Histologcal specimens were obtained in each group at postoperative 16 weeks. Histologic findings of the dissected bleb were examined with light microscopy an electron microscopy after hematoxyline and eosin (H & E), collagen and immunopathologic stains. Results: Postoperative intraocular pressure(lOP) decreased in group B and C after some influx of aqueous humor into the bleb. In group A, histopathologically, proliferation of collagen fibers, inflammatory cells, and fibrous-vascular tissue were found and arranged coarsely. In group C, more dense collagen fibers were found than in group B at early postoperative period, but at 16 weeks, both groups showed similar histological structure. Inflammatory cells and fibroblasts were decreased and the gap between collagen fibers and microcysts were increased in group B and C at 16 weeks. Conclusion: We find that the histological changes of posterior bleb with Ahmed glaucoma valve implantation depend on the influx of aqueous humor and the time of influx. This study shows that aqueous humor inhibits cell proliferation, especially fibroblast, and contributes to microcystic change.
인체결막중층상피세포배양을 이용한 콕사키바이러스 결막염의 ex vivo 모델
Purpose: The purpose of this study was to establish an ex vivo model of coxsackievirus conjunctivitis since there seems to be no suitable disease model currently.. Methods: Human conjunctival epithelial cells (HCECs) were cultured for 2 weeks in a serum-free air-liquid interface system to produce a multi-layered structure. The cells were infected with coxsackievirus A24 (CVA24). Histological changes were investigated by staining the cells with H&E and DAPI, and apoptosis was evaluated using the TUNEL technique. Virus replication was measured in HeLa cells infected with viral progeny from multi-layered HCECs, after 1 and 3 days, using the TCID50 method. Results: Cultured HCECs formed multiple layers. The cells showed characteristics of conjunctival epithelial cells and goblet cells, being immunohistochemically positive for CK19 and MUC5AC, respectively. CVA24 replicated readily in cultured multi-layered HCECs. A mild cytopathic effect was noted 1 day after viral inoculation. Cell damage was extensive at 3 days. TUNEL imaging confirmed that the cytopathology was attributable to apoptosis. The TCID50 data from HeLa cells indicated that the virus was actively replicating at both the first and the third day after inoculation. Conclusions: The novel conjunctivitis model may be useful to investigate the pathogenesis of acute hemorrhagic conjunctivitis and the effectiveness of antiviral treatments.
치료중인 원발개방각녹내장 환자에서 시신경유두 함몰속도와 시야결손 진행속도간의 상관관계
목 적 : 장기간의 추적관찰이 가능했던 치료중인 원발개방각녹내장 환자에서 시신경손상 및 시야결손의 진행속도를 알아보고자 하였으며, 동시에 시신경유두함몰속도와 시야결손진행속도간의 상관관계 및 이와 연관된 인자를 분석해 원발개방각녹내장 환자의 현 상태에서의 향후 예후판정의 가능성을 알아보고자 하였다. 방 법 : 10년 이상 경과관찰중인 원발개방각녹내장 환자 40명의 시신경유두를 입체 안저 카메라로 촬영한 후 512×512의 pixel image로 디지탈화 하여 tagged image file format(TIFF) 형태로 컴퓨터에 저장하고 computer aided planimetry와 손에 드는 입체경를 이용하여 시신경유두함몰의 진행속도를 네 사분면(상비, 상이, 하이, 하비 지점)으로 나누어 입체적으로 평가하였다. 시야결손의 진행속도는 골드만 시야검사기의 14e isopter만 수동식 grid system을 이용하여 네 사분면으로 나누어 분석하였다. 시신경유두함몰의 속도와 시야 소실률 및 이들 간의 연관성 여부는 선형회귀분석법(linear regression model)을 이용해 분석하였고 임상적 특성들이 시신경유두함몰 및 시야 소실에 미치는 영향과 그 통계적 유의성은 다중회귀분석법(multiple regression model)을 이용하여 분석하였다. 결 과 : 40명의 원발개방각녹내장 환자 중 여자는 24명(64%)이었고 환자의 평균 연령은 59.5세, 시신경유두함몰의 평균 추적 관찰 기간은 16.49년, 시야 검사의 평균 추적 기간은 15.41년이었다. 시신경유두함몰의 속도는 평균 0.0067 ± 0.0061yr(하이측 0.0084 ± 0.009/yr, 상비측 0.0070 ± 0.010/yr, 상이측 0.0055 ± 0.007/yr, 하비측 0.0053 ± 0.010/yr)로 하이, 상비, 상이, 하비측 순으로 진행하였으며 시야결손의 속도는 평균 -1.07 ± 1.01/yr(상비측 -1.45 ± 1.72/yr, 하비측 -1.15 ± 1.56/yr, 상이측 -1.02 ± 1.41/yr, 하이측 -0.94 ± 1.34/yr)로 상비, 하비, 상이, 하이측 순으로 결손이 진행되었다. 시신경 함몰과 시야결손의 진행률은 서로 의미 있게 양의 상관관계를 가졌으며 내원전 녹내장 수술을 받았던 경우와 연평균 안압이 높았던 경우가 시신경 유두함몰의 속도가 빨랐고 초진시 안압이 높았던 경우와 초진시 사용하고 있는 약물의 개수가 적었던 경우에도 시야결손의 진행이 빨랐다. 결 론 : 치료중인 원발개방각녹내장 환자에서 시신경유두함몰의 진행속도는 0.0067/year, 시야 소실률은 -1.07/year로 아주 느린 진행을 보였으며 시신경유두함몰의 진행속도는 시야결손의 진행속도와 유의한 양의 상관관계를 보여(p<0.05) 임상적으로 시신경유두함몰의 진행 양상에 따른 시야결손의 진행을 예측할 수 있으며 향후 녹내장 환자의 추적 관찰에 도움이 될 것으로 사료된다. Purpose : To evaluate the rate of cup-disc ratio progression and visual field loss in treated patients with primary open angle glaucoma(POAG) and to know the correlation of rate between optic disc cupping and visual field progression with identifying associated clinical factors. Methods : Forty patients with POAG who treated over 10 years were taken optic disc photographs with fundus camera, and digitized to 512×512 pixel images, then saved in Tagged Image File format(TIFF). Cup progression was evaluated stereoscopically by using computer-aided planimetry and hand held stereopscope with dividing optic disc head in four portion(superonasal, superotemporal, inferotemporal, inferonasal) and four portion of visual field declination was evaluated with Goldmann perimetry using manual grid template system measuring 14e isopter only. Optic disc cupping and visual field progression and correlations were estimated using linear regression and all available clinical factors were evaluated for correlation with the rate of cup progression and visual decline using a multiple regression model. Results : Twenty four(62%)were woman. The mean age of patients were 59.5 years and mean follow-up period for optic disc progression was 16.49 year and 15.41 year for visual field progression. The rate of optic disc progression was 0.0067 ± 0.006/yr (inferotemporal 0.0084 ± 0.009/yr, superonasal 0.0070 ± 0.010/yr, superotemporal 0.0055 ± 0.007/yr, inferonasal 0.0053 ± 0.010/yr) and the rate of visual field loss was -1.07 ± 1.01/yr(superonasal -1.45 ± 1,72/yr, inferonasal -1.15 ± 1.56/yr, superotemporal -1.02 ± 1.41/yr, inferotemporal -0.94 ± 1.341yr). Cup progression and visual field decline were positive correlated stastistical significantly. History of incisional surgery before visit and higher yearly average intraocular pressures were correlated with faster optic disc dup progression. Higher initial intraocular pressure and fewer antiglaucoma medications at initial visits were associated with faster visual field progression. Conclusion : In treated patients with POAG, the rate of disc cupping was 0.007/year and visual field decline was -1.07/year showing slow progression. Since the optic disc cupping and visual field progression has significant correlation(p<0.05), we could make an estimate of visual progression state by evaluating optic disc cupping and it can be clinically useful when managing patients with glaucoma.
당뇨 각막에서 신경성장인자의 항 세포자멸사 및 항 염증효과
Purpose: To examine the effects of nerve growth factor (NGF) on apoptosis and inflammation in diabetic cornea using human corneal epithelial cells (HCECs) and streptozotocin-induced diabetic rat cornea. Methods: The effects of NGF on high glucose-induced apoptosis were investigated in HCECs using Annexin-V and PI staining, and cleaved caspase-3 and BAX expression levels. The effects of NGF on inflammatory response were examined using quantified IL-1β and TNF-α expression levels by multiplex cytokine analysis, and NF-kB activation and IkB-α degradation by western blot analysis. Diabetes was induced by intraperitoneal streptozotocin injection in male Sprague–Dawley (SD) rats. The SD rats were divided into 3 groups. (1) Control group (2) Diabetic control group (3) NGF group; Topical NGF were given 3 times a day for 3 weeks. Apoptosis was detected by TUNEL assay. The expressions of caspase-3 and IL-1 β were studied by immunohistochemistry in corneal tissues. Results: High glucose at 25 mM stimulated ROS generation, apoptosis, and release of inflammatory cytokines in HCECs. The addition of NGF markedly reduced the high glucose-induced ROS activation, Annexin-PI-positive cells, and levels of cleaved caspase-3, BAX, IL-1β, and TNF-α in HCECs. Enhanced apoptotic and inflammatory responses and expressions of cleaved caspase-3 and IL-1 β in the diabetic corneas of rat were observed. These responses were markedly reduced by NGF. Conclusions: Apoptosis and inflammation were enhanced in diabetic cornea and NGF contributed to reduction of apoptotic and inflammatory response in vivo and in vitro conditions. NGF may be a novel therapeutic approach for managing diabetic keratopathy.
외상성 각막 손상후 발생하는 혼탁의 억제에 대한 양막이식의 효과
외상성 심부각막손상이 있을 경우 치료 후에도 각막반흔의 형성으로 인한 혼탁으로 시력 예후가 좋지 않은 경우가 많다. 한편 양막에는 상피 재생을 촉진 시키고 염증 반응을 억제하는 작용이 있어 천공성 각막손상에 있어서 양막이식술을 시행할 경우에 각막혼탁이 억제되는지 평가하기 위해 연구를 시행하였다. 백색 가토 30마리(60안)를 대상으로 각막 중심부에 길이 6mm의 천공성 열상을 만든 후 아무것도 시행하지 않은 군, 양막이식술을 시행한 군, 콘택트렌즈를 덮어준 군의 세 군으로 나누어 각막혼탁의 발생을 비교하였고 조직학적으로는 염증세포 침윤의 정도, 간질세포의 배열 양상을 비교하였으며 α-smooth muscle actin 의 항체를 이용한 염색으로 각막의 조직구축과 연관된 α-smooth muscle actin 의 발현을 관찰하였다. 결과적으로 양막이식군이 다른 군에 비해 각막혼탁이 적었으며, 염증세포 침윤 및 α-smooth muscle actin 의 발현 또한 다른 군에 비해 낮은 수준임을 알 수 있었다. 결국 양막은 염증 및 창상 후 간질 내 섬유 모세포의 증식을 억제하여 비정상적인 간질의 증식을 막음으로써 각막혼탁의 발생을 줄이는 효과가 있다고 생각되며 이는 각막심부손상 환자에 있어서 시력 예후를 향상시키는데 임상적으로 큰 도움이 될 것으로 생각된다. This study was performed to evaluate the effect of amniotic membrane graft on corneal opacity after traumatic injury. Corneal penetrating wound was made by No. 15 surgical blade, 6mm in length, using 60 rabbit eyes. Each eye was divided into three groups; amniotic membrane applied group. contact lens applied group and control. Corneal opacity was analyzed with photoslit microscopy finding, histopathological finding, and expression of α-smooth muscle actin. As a result, grade of corneal opacity was lower in amniotic membrane applied group, Infiltration of the inflammatory cells and expression of α-smooth muscle actin were lower in amniotic membrane applied group. Architecture of stromal lamella was more regular in amniotic membrane applied group. These findings indicate that corneal opacity is associated with proliferation corneal stromal cells and the role of fibroblasts. In conclusion amniotic membrane graft was effective therapeutic method for prevention of corneal opacityafter trauma by inhibiting infiltration of the inflammatory cells, proliferation of stromal cell and wound contracture by fibroblasts.
황반원공 수술시 술전 원공의 크기와 가장자리박리 높이에 따른 술후시력 및 황반두께와의 연관성
본 연구는 황반원공의 치료를 위한 유리체절제술시 술전 원공의 크기와 가장자리박리의 높이가 술후 시력 및 황반두께에 미치는 영향에 대해 알아보고 술전 원공의 상태가 술후 결과를 예측할 수 있는 지표로 사용할 수 있을지에 대해 알아보고자 하였다. 특발성 황반원공 3 기 및 4 기로 진단받고 유리체절제술, 내경계막 제거술 및 안내가스 주입술을 시행받은 14 명 14 안을 대상으로 술후 3 개월째 빛간섭단층촬영을 시행하여 황반두께를 측정하였으며 이는 술전에 측정된 원공의 크기 및 가장자리박리 높이와 비교하여 이들 사이의 연관성을 알아보았다. 모든 환자에서 원공예후인자(HPF : Hole Prognostic Factor)를 계산하였으며, 이는 술전의 빛간섭단층촬영 상 원공연의 외망상층 양끝에서 낭포망막부종이 시작되는 망막색소상피층상의 양측 시점에 이르는 거리를 두 시점 사이의 거리로 나눈 값으로 정하였다. HPF의 수치가 0.8 이상인 군을 1 군, 0.8 미만인 군을 2 군으로 하였고 각 군에서 술전 시력, 술전 증상의 기간, 술후 시력, 술후 황반두께를 비교분석하였다. 술후 두 군 모두에서 술전에 비해 술후 시력에 개선을 보였으며, 두 군 사이의 비교에서는 1 군이 2 군보다 통계학적으로 유의하게 호전되었다. 술후 황반두께는 1 군에서 평균 165.29 ㎛, 2 군에서 평균 133.14 ㎛로 1 군에서 2 군보다 평균 32.15 ㎛ 두꺼웠지만 통계학적으로 유의하지 않았다. 또한 두 군 모두에서 술후 황반두께와 술후 시력에 연관성을 보이지 않았으며, 술전 증상의 기간에 따른 술후 시력에도 상관관계를 보이지 않았다. 본 연구에 사용된 황반원공예후지표인 HPF는 원공기저부의 직경과 원공내경의 직경이 작을수록, 가장자리의 높이가 높을수록 증가되는 경향을 보였으며, HPF의 수치가 클수록 술후 황반부 두께의 증가와 함께 시력호전정도가 좋았다. 따라서 HPF를 이용하여 술전 원공의 형태에 따라 술후 해부학적 성공률과 기능적 성공률을 예측할 수 있는 척도로 사용가능하다고 생각된다. This study was aimed to evaluate the role of a preoperative optical coherence tomography measurements in predicting the postoperative functional outcome in macular hole surgery. Fourteen eyes of 14 patients who underwent the vitrectomy for idiopathic stage 3 or 4 macular holes were enrolled in this study. The influence of the preoperative hole configuration on the postoperative visual acuity (VA) and foveal thickness were evaluated. By calculating the hole prognostic factor (HPF), the eyes with the HPF>0.8 or <0.8 were assigned as group 1 or group 2, respectively. HPF was defined as value of the sum of both arm lengths from both ends of RPE level corresponding the thickened macula to the outer plexiform layer onthe margin of a macular hole divided by the distance between both RPE points. In both group 1 and 2, postoperative VA was improved (p=0.017, P=0.018), and a difference of the improvement level of VA between the two groups was statistically significant (p=0.05). The postoperative foveal thickness in the group 1 was thicker than the group 2 by 32.15 ㎛ in average, however, it was not statistically significant. There was also no significant correlation between the postoperative VA and the postoperative foveal thickness or the symptom duration. This study demonstrated that the HPF would be a prognostic factor for postoperative visual outcome in macular hole surgery.