착상전 배아에서 특이적으로 발현되는 유전자 발현양상에 대한 연구 : Studies on Expression Profile of Stage-specific Differentially Expressed Genes in Preimplntation Embryos of Pig and Cattlea

황규찬 경상대학교 대학원 2006 국내박사

포유동물의 난자성숙 및 배아발달에 관한 연구는 긴 역사에도 불구하고 아직도 확실한 기전이 알려져 있지 않다. 최근에 분자생물학과 유전체학의 발달로 genome-wide study가 활발히 진행되면서, subtraction hybridization, DD-RT-PCR, 그리고 DNA chip 등을 이용하여 유전인자를 한꺼번에 찾아내는 연구가 활발하게 진행되고 있다. 그러나, 난자시료의 양적인 제한성과 기존에 사용된 DD-RT-PCR 방법들은 많은 시간이 소요되었고 false negative clone들이 많아 연구에 어려움을 겪었다. 본 연구에서 annealing control primer를 이용한 GeneFishing system은 기존의 방법과 비교하여 쉽고 빠르게 유전자 발현을 비교할 수 있는 방법으로 5% 내외의 false negative result를 나타내었다. 첫번째 연구는 GeneFishing system를 활용하여 maternal transcript를 동정하기 위해 소의 미성숙 난자 (GV)와 8-세포기 및 배반포 수정란으로부터 유래된 전사체들을 서로 비교하여 특이적으로 발현하는 transcript를 동정하였다. 그 결과, 미성숙 난자에서만 특이적으로 발현되는 4개의 유전자인 DNCL1, FANK1, GTL3, 그리고 ZP2를 발견하였다. 동정된 유전자들은 착상전 난자 발달 단계별로 발현 패턴을 보기 위해 RT-PCR과 real-time qRT-PCR assay을 수행하였다. 이들 유전자들은 미성숙 난자 (GV)에서 많은 양으로 발현 되기 시작하여 4-세포기까지 유지된 후 zygotic genome activation (ZGA)이 일어나기 시작하는 8-세포기 난자부터 점차 줄어드는 유사한 발현 패턴을 보였다. ZP2 유전자는 maternal transcript의 대표적인 유전자로서 zona pellucida를 구성하는 유전자중 하나이고 종 특이적 정자의 수용체, 첨체반응의 유도, 여러 정자의 난자 유입 방지, 그리고 자궁에 착상하기 까지 난자를 보호하는 역할을 수행한다. DDLC1 (cytoplasmic dynein light chain)는 nitric oxide synthase (NOS)와 결합하여 nitric oxide (NO) 생성을 억제하는 것으로 알려졌다. 이러한 결과를 미루어 보아 Nitric oxide 항상성 조절을 함으로써 난자의 초기 발달에 중요한 역할을 수행하리라 사료된다. FANK1과 GTL3는 어떠한 기능이 밝혀지지 않은 novel 유전자들 이지만 FANK1에 존재하는 FN3과 ANK domain 그리고 GTL3의 DUF667 domain의 역할로 보아 초기 착상전 난자에서 signal pathway에 관여하리라 사료된다. 두번째 연구는 단위발생으로부터 유래된 2-세포기 와 배반포 난자를 서로 비교함으로써 2-세포기에 우세하게 발현되는 9개의 유전자를 발견하였다. 이들 유전자들을 기능적 역할로 나누어 보면 cytoskeleton reorganization에 GDI-2, MTMR3, MKLN1, 그리고 ePAD유전자, Nucleocytoplasmic traffic에 NUP88 유전자, nonsense-mediated mRNA decay에 UPF3B 유전자, cell cycle progression에 ITGA2 유전자, 그리고 CIRHIM과 CGI-140 유전자로 분류할 수 있고 GenBank/EMBL database에 등록된 다른 종의 유전자들과 78-95%의 유사한 서열을 가지고 있다. RT-PCR과 real-time qRT-PCR assay를 통해 초기 착상전 난자들 중에 중기 II 단계, 1-세포기, 그리고 2-세포기 난자에서 특이적으로 발현되는 발현 패턴을 확인하였다. 이들 유전자들 ( DNCL1, FANK1, GTL3, ZP2, GDI-2, MTMR3, MKLN1, ePAD, NUP88, UPF3B, ITGA2, CIRHIM, 그리고 CGI-140)이 IVF 혹은 parthenogenesis 그리고 in vitro culture 조건하에서 비특이적으로 발현되는 유전자 인지를 검증하기 위하여 in vivo 생쥐 난자에서 이들 유전자의 발현 패턴을 조사하였다. 그 결과, 생쥐 난자 발달 과정중 ZGA전 단계인 중기 2 난자와 1-세포기 난자에서 우세하게 발현됨을 밝혔다. 이러한 결과는 이들 유전자가 미성숙 난자의 반수체 chromosome으로부터 발현되는 maternal gene로서 초기 난자 발달에 중요한 역할을 하리라 사료된다. 세번째 연구는 착상에 관여하는 유전자를 동정하기 위해 초기 blastocyst 난자에 비해 hatched blastocyst 난자에 우세하게 발현되는 9개 유전자를 ACP-based DDRT-PCR system을 활용하여 발견하였다. 이들 FTL, RPS12, LAPTM4a, RPL12, AIBP, CULLIN-1, HDLP, COX5a, 그리고 RECS1 유전자들은 RT-PCR과 real-time qRT-PCR 방법에 의해 착상전 배아 발단 단계중 hatched blastocyst 배아에서만 우세하게 발현되는 발현패턴을 확인하였다. 이들 유전자들중 일부는 배아 착상에 중요한 역할을 할 것으로 사료된다. 앞으로 이들 유전자를 knock-out 시스템 혹은 RNAi를 활용한 knock-down 시스템으로 없애거나 혹은 발현을 저해하므로써 난자의 발달과정중 특이 난자의 초기 발달에 어떠한 역할을 수행하는지 확인하는 연구가 필요하다고 본다.

수열의 극한의 두 가지 정의방식에 대한 이해와 적용능력에 관한 실태조사

황규찬 고려대학교 교육대학원 2008 국내석사

학생들은 무한의 개념을 받아들이는데 많은 어려움을 겪을 뿐 아니라 정의를 왜곡하여 이해하고 있는 학생들이 많기 때문이다. 그래서 수열의 극한을 배운 고등학교 학생들을 대상으로 수열의 극한의 정의에 대한 실태와 오개념들을 조사하고 이에 대한 대안으로 수열의 극한의 다른 방식의 정의의 도입에 대한 반응을 조사하였다. 또한 교사들은 수열의 극한을 어떻게 지도하고 있으며 수열의 극한의 정의를 다른 방식으로 지도하는 것에 대한 의견을 조사하였다. 고등학교 3학년 학생들의 극한의 정의에 대한 이해 능력에 관한 조사와 교사들의 정의의 지도방법을 조사하기 위해 검사 도구를 통한 조사연구 방법을 사용하였다. 실시한 검사지는 총 3가지로 학생들을 위한 검사지 2개와 교사를 위한 검사지 1개이다. 수열의 극한을 배운 고등학교 학생들이 수열의 뜻을 정확하게 이해하는지 살펴보고 수열의 극한의 정의를 어떻게 이해하고 어떤 오류를 보이는지를 살펴보았다. 그리고 수열의 극한에서 수렴에 대한 많은 오개념들과 극한의 성질에 대한 엄밀한 설명을 하기 위해서는 수열의 극한의 다른 정의 방식인 논법 정의 방식이 필요하다고 보고 논법을 설명하고 그에 대한 학생들의 반응과 교사들의 입장에 대해 살펴보았다. 본 연구의 목적은 수열의 극한의 정의가 일상어에서 오는 오류로 인해 많은 학생들이 오개념을 갖게 되었다. 또한 현재의 수열의 극한의 정의 방식으로는 현재 교과서에서의 극한의 수렴, 수열의 극한의 성질들에 관한 설명을 논리적으로 설명할 수 없다. 따라서 이러한 오개념의 수정과 수학적 논리성을 확보하기 위해서는 논법도 동시에 설명하는 것이 필요하다고 본다. 학생들이 논법에 대해 많은 어려움을 느끼게 되지만 많은 교수학습 자료의 개발로 쉽게 접근하게 한다면 학생들에게 수열의 극한의 단원을 학습하는데 많은 도움을 줄 수 있을 것이다.

수학 및 수학 교수?학습에 대한 중등 예비교사의 신념 연구

황규찬 인하대학교 대학원 일반대학원 2015 국내석사

본 연구의 목적은 양적연구를 통해 예비교사들의 신념이 성별, 학년에 따라 차이가 있는지 살펴보고 학교수학에 대한 신념과 학문으로서의 수학에 대한 신념이 일치하는지 알아봄으로써 교원양성 과정에서 시사점을 얻고자 했다. 설문조사를 통해 사범대에서 수학하고 있는 중등 예비교사 111명을 대상으로 수학에 대한 신념, 대학 수학 학습에 대한 신념, 중등 수학 학습에 대한 신념, 수학 교수·학습에 대한 신념을 분석하였다. 예비교사들은 수학교육의 목표인 실용성, 도야성에 동의하고 있는 것으로 나타났으며 수학교육의 몇몇 주제에 대해서는 예비교사들의 신념이 크게 엇갈리는 것으로 나타났다. 성별과 학년에 따른 신념의 차이가 존재했으며 성별에 따른 차이에서는 교수·학습에 대한 신념이 가장 큰 차이를 보였지만 학년별 차이에서는 수학에 대한 신념에서 가장 큰 차이를 보여 학년과 성별에 따른 차이가 서로 다른 형태로 나타났다. 중등수학 학습에 대한 신념과 대학수학 학습에 대한 신념에 대해 동일한 설문문항을 제시하고 응답결과가 일치하는 정도를 살펴본 결과 두 신념이 서로 일치하는 경우와 일치하지 않는 경우 모두 나타났다.

新羅 表員의 『華嚴要義問答』硏究

황규찬 동국대학교 대학원 1996 국내박사

The period which Hua-yen Buddhism actively made its way to Korea was during the Unified Silla dynasty. Since then, Hua-yen Buddhism became a major philosophy for the doctrinal study of Korean Buddhism, and this tradition was carried through the present time by becoming the root for Korean Buddhism. Monk P'yowon's Questions and Answers on the Quintessential meanings of Hua-yen Buddhism (華嚴經文義要決問答, Youi-mundap) is a text that he composed during the Unified Sill a period. Presently, Youi-mundap happens to possess most volumes among all the texts on Hua-yen Buddhism from the Unified Silla period. In his text, he arranges Hua-yen philosophy into major catagories, where he expounds the meaning by often referring to the teachings of Hua-yen masters in China. P'yowon was a great scholar of Hua-yen Buddhism who, according to my speculation, had lived and been active in the eighth century A.D. sometime in the periods of 699 A.D. when Eighty Hawom was completed to 797 A.D. when the Japanese transcribed his text. He was a monk at Huangyong temple which was under great influences of Wonhyo and Uisang's methodologies on understanding Hua-yen Buddhism at the time. However, he seemed to have followed neither the traditions nor the schools of these prominent Korean monks, but rather took up the traditions of Chinese Hua-yen Buddhism by often referring to the teachings of many Chinese Hua-yen masters. Nevertheless, he amalgamated and harmonized various theories on Hua-yen philosophy that existed both in Korea and in China by creating one of the most comprehensive text on Hua-yen Buddhism that includes all categories of the subject. He kept his objective and critical view by not leaning toward any particular system of thought from any school or sect. His text, Youi-mundap, is characterized by having three major categories of titles, theories, and questions and answers that involve Hua-yen Buddhism. Because Pyowon makes numerous references to the commentaries made by other masters and from Tripitika, his text- could seem as a simple work of transcription. When we examine it closely, however, we can easily perceive his own particular views that seem to have generated after his crucial examinations of all his eclectic resources. The purpose my research is to examine P'yowon's theory on Hua-yen Buddhism by looking into his text, Youi-mundap. My theses is divided into five major chapters: First, the introduction. Second, profile on Pyowon's life and his achievements and his texts. Third, P'yowon and Hua-yen scholars of his time. Fourth, analysis on his text, Youi-mundap, for its structure and contents. Fifth, special cteristics on the philosophy of Youi-mundap. The following points were obtained from Youi-mundap. First, from the discovery of a new existing copy of the text, estimating the period of p'yowon's life became more accurate. Second, the speculation that P'yowon and one of Uisang's disciple, P'yohun are of the same person has been proved wrong. Third, even though P'yowon often refers to Hua-yen masters in China and to other Hua-yen scholars of Silla dynasty, he is an independent thinker who harmonized various theories on Hua-yen Buddhism with his objective views. Fourth, partial contents of the few non-existing texts were found in Youi-mundop in the references made. These were master neum(□法師)'s Popgyongnon(法鏡論) and his theories behind it which are predominantly referred in siljeei(實際義) and yhoyhoei(如如義), and the original contents of Wonhyo's bopobei(普法義) have been referred. Thus, Youi-mundap is an important historical text as well. Fifth, the existing copies of Youi-mundap has numerous errors, mistakes, and omissions of Chinese characters from the original text. However a recent discovery of the copy of the text found in Enryaku-ji temple (廷曆 temple) in Hiei mountain in Japan, which is a transcription made by the Japanese approximately 1200 years ago then became their national treasure during Meiji 33years, has made possible to correct the text that is recorded in Korea Buddhist texts(韓國佛敎全書) close to its original writing which also can enhance the translation of the text. Also, three additional copies were discovered in Japan which further assisted in making better and more accurate adjustments of the text., Sixth, when we examine each chapters and their theories from its original text, it refers to meaning of seven place nine meeting(七處九會義) which tells us that P'yowon used Eighty Hawom(八十華嚴) as the main sutra in composing his text when he was a monk at Whangyong temple. Seventh, although P'yowon's name disappeared as one of the major thinker of Hua-yen Buddhism In Korea, his name appears in the Japanese text, Hawomjong-soLip-oukyo-sipjong daiei-lakcho(華嚴宗所立五敎十宗大義略抄) along with other Hua-yen masters. It shows that he was celebrated in <Japan as one of the prominent Hua-yen masters, and many old Japanese texts have made references to his text. Since the beginning of Heian period, they have preserved the transcribed copy of his text. Also, in Do Dai temple in Japan, they have created mantra from the text to be recited during the rituals. It is safe to conclude that P'yowon's philosophy on Hua-yen Buddhism gave greater influence in Japan. P'yowon's exposition on Hua-yen in eighteen chapters have enhanced the understanding of Hua-yen philosophy, which is claimed to be the Buddha's enlightenment, itself. It possesses the necessary theories for establishing foundation in attaining 'Buddha-nation' through the bodhisattva path which benefits all sentient beings.

華嚴十玄緣起說의 成立過程 考察

황규찬 동국대학교 대학원 1987 국내석사

Sacharomyces Cerevisiae Rasse O의 배양조건과 Trehalose를 중심으로 한 菌體主成分과의 관계에 관하여

황규찬 건국대학교 1968 국내박사

原發性 肝癌患者의 腹水 r-glutamyl transpeptidase 活性値에 關한 硏究

황규찬 고려대학교 1981 국내박사

沈菜類 熟成 細菌과 Vitamin B12 生産性

황규찬 慶熙大學校 1983 국내박사

Schizosaccharomyces pombe의 tRNA splicing mutant와 그 유전자의 분리

황규찬 청주대학교 대학원 1997 국내석사