Induction of apoptosis by sanguinarine in human cancer cells

한민호 Dong-Eui Univ. 2012 국내박사

Sanguinarine은 양귀비과에 속하는 혈근초(Sanguinaria canadesis)의 뿌리로부터 유래하는 benzophenanthrridine alkaloid의 일종으로 항균, 항염증, 항산화및 항암효능 등과 같은 다양한 약리 작용이 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 sanguinarine의 항암작용에 대한 부가적인 해석을 위하여 인체암세포의 증식억제와 세포사멸 유도에 관한 기전 해석을 시도하였다. 이를 위하여 먼저 U937 인체 혈구암 세포에 sanguinarine을 처리하였을 경우 처리농도 및 시간 의존적으로 세포의 성장억제 효과가 나타났으며, 이 러한 성장억제는 apoptotic body의 형성, DNA 단편화현상 및 sub-G1기에 속하는 세포의 증가 등을 통하여 세포사멸과 연관성이 있다는 것을 알 수 있었다. Sanguinarine이 유발하는 세포사멸은 미토콘드리아의 기능이상에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 Bcl-2 family 중 세포사멸을 유도하는 유전자인 Bax의 발현증가 및 세포사멸을 억제하는 유전자인 Bcl-2의 발현 감소와 함께 세포사멸의 작용자로 알려진 caspase-3의 활성화가 관여하는 것으로 나타났다. 특히 세포사멸 억제 유전자인 Bcl-2를 과발현시켰을 경우와 caspase-3 특이적 억제제인 z-DEVD-fmk를 처리하였을 경우 sanguinarine에 의하여 유발된 세포사멸이 현저하게 억제되었으므로 Bcl-2 및 caspase-3가 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있었다. 다음으로 인체 대장암 세포인 HCT-116 세포에서 sanguinarine에 의하여 유도되는 세포사멸에 대해 조사하였다. HCT-116 세포에서도 sanguinarine 처리에 의하여 농도 의존적인 증식억제 현상 및 세포사멸 유도가 확인되었다. Sanguinarine이 유발하는 세포사멸에 있어서 Bcl-2 family 중 세포사멸 억제 유전자인 Bcl-2의 발현감소 및 세포사멸 유도 유전자인 tBid의 발현증가에 따른 미토콘드리아 기능이상의 증가와 함께 caspase의 활성을 억제하는 것으로 알려진 IAP family 중 XIAP 및 cIAP-1의 발현감소가 관찰되었다. Sanguinarine은 caspase-3, -8 및 -9의 활성증가와 함께 caspase-3의 기질단백질인 PARP의 단편화 현상을 유발하였으며, pan-caspase 억제제인 z-VAD-fmk의 선처리에 의하여 caspases의 활성을 억제하였을 경우 sanguinarine에 의하여 유발된 세포사멸이 완벽하게 억제되는 것으로 조사되었다. 또한 sanguinarine은 매우 빠른 시간에 활성산소종을 발생시켰으며, 활성산소종 억제제인 NAC을 선처리 하였을 경우 발생된 활성산소종이 완벽하게 제거 되었을 뿐 만 아니라 sanguinarine에 의하여 유발된 세포사멸과 그에 따른 분자적 변화가 완벽하게 억제된다는 것을 확인하였다. 뿐 만아니라 sanguinarine은 EGR-1, p38 및 JNK의 활성화를 유발하는 것으로 나타났으므로 각각의 유전자들을 억제하였을 경우 어떠한 변화가 유발되는지를 확인한 결과 EGR-1의 siRNA를 이용하여 EGR-1 발현을 억제 하였을 경우에는 sanguinarine에 의한 세포사멸이 부분적으로 억제되는 것으로 나 타났으나, p38 및 JNK 억제제를 선처리하였을 경우에는 sanguinarine에 의한 세포사멸에 아무런 영향을 미치지 못하는 것으로 조사되었다. 마지막으로 인체 방광암 세포에서 sanguinarine이 유발하는 항암기전을 조사하였다. 이를 위하여 인체 방광암 세포인 T24, EJ 및 5637 세포에 sanguinarine을 각각 처리하였을 경우 농도 의존적인 증식억제 현상이 나타났으며, 이러한 증식억제 현상은 세포사멸과 밀접한 연관이 있다는 것을 알 수 있었다. Sanguinarine이 인체 방광암 세포에서 유발하는 세포사멸의 경우 Bcl-2 family 및 IAP family의 발현변화와 함께 caspases의 활성화가 관여하는 것으로 조사되었으며, 활성산소종의 증가도 중요한 역할을 하는 것으로 나타났다. 따라서 활성산소종 억제제인 NAC의 선처리에 의하여 활성 산소종을 억제하였을 경우 어떠한 변화가 유발되는 지를 확인한 결과sanguinarine에 의하여 유발된 유전자들의 발현 변화 및 세포사멸이 억제되는 것으로 조사되었다. 또한 sanguinarine은 JNK 및 EGR-1의 활성화를 유발하였으며, 이러한 JNK 및 EGR-1의 활성화도 NAC의 의하여 완벽하게 억제된다는 것을 확인하였다. 하지만 JNK 억제제를 선처리하였을 경우에는 sanguinarine에 의한 세포사멸에 아무런 영향을 미치지 못하였으며, EGR-1siRNA의 경우에는 sanguinarine에 의한 세포사멸을 부분적으로 억제하는 것으로 조사되었다. 이상의 결과들을 종합해 보면 여러 종류의 인체 암세포에서 sanguinarine은 세포사멸을 유발하였으며, 이러한 세포사멸은 Bcl-2 family 및 IAP family의 조절과 함께 caspases의 활성화가 관여한다는 것을 알 수 있었다. 또한 이러한 일련의 세포 사멸 신호경로를 조절하는데 있어서 활성 산소종과 세포사멸 유도 관련 전사인자인 EGR-1이 중요한 역할을 한다는 것을 확인 할 수 있었다.

Mineralogical and geochemical studies of the taedu gold-silver deposit

한민호 高麗大學校 1985 국내석사

동일 형상 캐비티 사출금형에서의 충진 밸런스 개선

한민호 경상대학교 대학원 2018 국내석사

The filling imbalance caused by variables of the perfectly symmetric multi cavity injection mold was not predicted by previous research and molding analysis. In this study, a filling balance improvement method is proposed especially for the same shape cavity injection mold process which emulates filling imbalance by reducing the gate diameter in the molding analysis and compensates it by inversing in actual mold. This method first reveals the reason of imbalance in filling cavities and find the appropriate mold design which reflects the actual situation. Second, mold modify in conducted to calculated unbalanced filling. The maximum difference between the gate diameters calculated in this research and them of real molds of the specialist was 15%. Previous improvements in filling imbalance have been carried out by non-computational methods based on expert experiments. In this study, research and experiments were conducted in a way that can be managed by the process through analysis.

5(6)-Carboxyfluorescein을 담지한 인지질 리포좀의 제조 및 박테리아 센싱 평가에 대한 연구

한민호 영남대학교 대학원 2022 국내석사

In the case of occlusive dressings currently used in dressings for burn treatment, it is impossible to confirm the replacement time, so replacement is delayed, resulting in additional infection. To solve this problem, liposomes capable of bacterial sensing were prepared using 5(6)-Carboxyfluorescein, Phosphatidylcholine, 1,2-Dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine, Cholesterol, and 10,12-Tricosadiynoic acid. In this study, evaluation of changes in drug encapsulation rate in liposomes according to changes in three types of phosphatidylcholine phospholipids during liposome production, high-performance phosphatidylcholine phospholipids selected through vesicle size analysis, low and high temperature stability evaluation, bacterial sensitization ability evaluation, animals Cell responses were assessed.

CE 라우터 기반의 MPLS VPN 설계 및 구현

韓玟昊 충남대학교 2001 국내석사

A VPN(Virtual Private Network) is the private network constructed logically within a public network infrastructure. There have been numerous studies to support the VPN services by using the technologies such as IP in IP, GRE, L2TP, and MPLS and so on. Especially the VPN using MPLS has many in aspects of QoS, security, and management, compared with other methods. As an enhanced method of MPLS VPN based on PE(provider edge)router, this paper presents MPLS VPN based on CE(customer edge) router. As a matter of fact, CE based VPN has more advantages than PE based VPN with respect to independency, scalability, security and complexity. This paper describes the functional architecture and internal behavior of MPLS VPN based on CE router and compares the performance of CE based MPLS VPN with that of PE.

교과재량활동을 통한 제 7차 교육과정 고등학교 국사의 지역사 학습모형 연구 : 안산 지역을 중심으로

한민호 연세대학교 교육대학원 2008 국내석사

커피전문점의 친환경 활동이 재방문의도에 미치는 영향 : 환경지식의 조절효과를 중심으로

한민호 초당대학교 일반대학원 2024 국내석사

커피전문점의 친환경 활동이 재방문의도에 미치는 영향 - 환경지식의 조절효과를 중심으로 - 한 민 호 초당대학교 대학원 조리과학전공 지도교수 한 지 수 최근 소비자들은 욕구가 다양해지고 있기 때문에 전통적으로 환대산업 기업에서 중요하다고 평가되었던 서비스 품질이나 가격, 위치, 제품만으로 고객을 충족시키기 가 어려워지고 있다. 이때 기업의 경쟁력을 극대화 시킬 수 있는 전략 중 하나가 기업의 친환경 활동이다. 이에 본 연구에서는 커피전문점의 친환경 활동이 재방문 의도에 미치는 영향을 살펴보고자 하였다. 또한 커피전문점의 친환경 활동과 재방문의도 간에 환경지식의 조절효과를 검증해보고자 하였다. 본 연구는 전라도 지역의 친환경 활동을 하는 커피전문점을 방문한 경험이 있는 성인을 대상으로 설문조사를 실시하였다. 조사 기간은 2023년 7월 3일~7월 21일 까지 조사를 실시하였다. 설문조사는 구글 설문지를 이용한 온라인 조사를 실시하였으며, 총 230부를 배포하여 이 중 불성실한 응답 설문지 14부를 제외한 후 216부를 본 분석에 사용하였다. 연구결과를 요약하면 다음과 같다. 첫째, 커피전문점의 친환경 활동(환경 친화 제품 및 서비스, 자원 재활용)은 재방문 의도에 유의한 영향을 미치는 것으로 나타났다. 둘째, 커피전문점의 친환경 활동(환경 친화 제품 및 서비스, 자원 재활용)과 재방문의도 간에 환경지식은 조절효과가 있는 것으로 나타났다. 연구결과를 토대로 학문적 시사점과 실무적 시사점을 제시하고자 한다. 학문적 시사점은 다음과 같다. 첫째, 본 연구에서는 탐색적 요인분석을 통해 친환경 활동에 대한 하위요인, 환경 친화 제품 및 서비스와 자원 재활용의 2개 요인을 추출하였으며, 이는 친환경 활동을 개념화하는데 이론적인 기여를 한다고 볼 수 있다. 둘째, 커피전문점의 친환경 활동과 재방문의도 간의 관계, 커피전문점의 친환경 활동과 재방문의도 간에 환경지식의 조절효과를 살펴보기 위해 선행연구를 바탕으로 가설을 설정하여 실증분석을 통해 가설을 검증하였다. 이러한 연구결과는 커피 전문점의 친환경 활동에 관한 이론모형 구축에 기여할 수 있을 것이다. 셋째, 커피전문점의 친환경 활동과 재방문의도 간에 환경지식의 조절효과를 검증 함으로써 다수의 선행연구에서 독립변수로 사용되어진 환경지식을 조절변수로서 확인한 것은 학문적으로 큰 의의가 있다고 볼 수 있다. 학문적 시사점은 다음과 같다. 첫째, 커피전문점에서 사용하는 컵, 냅킨 등은 재활용 원료를 활용한 집기이며, 포장 용기도 과대 포장을 하지 않고, 환경친화적인 포장재를 사용한다. 또한 커피전 문점의 자원 재활용을 위한 분리수거를 실행하며, 매장 또한 환경친화적으로 설계 하고 있다. 이러한 친환경 활동은 소비자들을 재방문하도록 하는데 매우 중요한 변수로 작용하고 있다고 볼 수 있다. 또한 커피전문점에서 제공하는 자원 재활용에 대한 방침과 안내를 명확히 제공함으로써 재방문의도가 증가할 뿐만 아니라 이는 소비자들의 환경 인식을 향상시키는데 도움을 줄 수 있을 것으로 본다. 친환경 활동을 선두하는 대표적 기업인 스타벅스는 개인 컵을 가지고 오는 손님들에게 할인 혜택을 제공하여 소비자의 친환경 활동을 유도하고 있으며, 친환경 자재를 사용해 매장을 설계하고 있다. 이렇게 커피전문점에서는 단순히 재료와 운영 방식이 친환경적이라는 메시지를 전달하는 홍보 방식에서 벗어나 환경 인식의 중요성을 소비자와 함께 공유하고, 친환경 행동을 적극적으로 실천하는 소시에탈 마케 팅(societal marketing)활동을 실시함으로써 업체 이미지뿐만 아니라 소비자의 삶의 질을 높이는데 앞장설 수 있어야 할 것이다. 또한 이러한 마케팅 활동이 궁극적으로는 매출액 향상에 기여할 수 있을 것이다. 둘째, 환경지식이 높은 소비자들일수록 커피전문점에서 제공하는 자원 재활용에 대한 안내서나 방침과 같은 친환경 활동에 주의를 기울임으로써 커피전문점의 재방문 증가에 도움을 줄 수 있을 것이다. 따라서 환경지식을 향상시킴으로써 기업의 이익 증대 뿐만 아니라 환경에 긍정적인 영향을 미치는 활동을 할 수 있다는 것이다. 셋째, 환경지식이 높은 소비자들일지라도 환경 친화적인 제품이나 서비스와 같은 친환경 활동이 커피전문점의 재방문의도를 오히려 감소시킬 수 있는 것을 알 수 있다. 이러한 친환경 활동 때문에 커피전문점을 다시 방문할 만큼 커피전문점을 이용하는 소비자들의 환경지식이 많이 높지 않다고 볼 수 있다. 따라서 환경지식을 향상시킬 수 있도록 정부와 함께 현실에 적합한 교육정책이 필요할 것으로 보여진다.

아이젠하워 행정부 시기 과학자집단의 정책결정과정 참여와 과학자문시스템의 형성:국방동원국 소속 과학자문위원회를 중심으로

한민호 고려대학교 대학원 2021 국내석사

일련의 냉전기 과학에 관한 연구들은, 일반적으로 ‘과학이 냉전에 어떠한 영향을 미쳤는가?’와 ‘냉전이 과학에 어떠한 영향을 미쳤는가?’와 같이 확실하게 이야기되는 범위만 다루었다. 냉전기 과학자문에 관한 연구들도, 이러한 한계에서 크게 벗어나지 못하였다. 많은 연구들은 일반적으로, 과학자문의 활동을 정책의 기술적인 문제를 해결하기 위해 과학자들이 전문지식을 제공했다는 역할에 관한 이야기와 정책결정자들이 정책의 방향을 결정하는 데 있어 과학자문을 어떻게 활용했는지에 대한 이야기를 중점적으로 다루었다. 이러한 단순 이분법은, 냉전과 과학을 명확하게 분리한다는 장점이 있지만, 복잡성과 역동성을 가리는 단점이 있다. 따라서 본 논문에서는 대통령에 대한 과학자문이 단순히 ‘정보를 제공하는 것’이 아니라 정책결정과정도 연관되어 있으며, 이로 인해 과학기술의 적절한 관리와 통제를 주장한 과학자문위원회가 결과적으로 급격한 군사기술의 발전에 영향을 미치게 된 과정에 주목하고자 한다. 이러한 문제의식에서, 냉전기 과학자문에 관련된 사료와 기존의 연구를 토대로 아이젠하워 시기 냉전기 과학자문이 지니는 의미를 재평가해보고자 한다. 본 논문에 대한 1차 자료는 미국 국립문서기록관리청(National Archives and Records Administration, NARA)과 아이젠하워 대통령 도서관(Dwight D. Eisenhower Library)에서 소장하고 있으며, 일부는 국사편찬위원회 전자사료관에서도 보관하고 있다. 이 중에서도 필자가 중심적으로 연구하는 자료는 과학자문위원회의 초창기 활동 문서인 3000-D 문서와, 1955년 작성된 소련의 기습공격에 관한 연구보고서이다. 이 외에도, 국가안전보장회의(National Security Council, NSC)의 문서들과, 트루만에게 과학자문위원회를 설립하라고 권고한 윌리엄 골든(William T. Golden)의 문서자료 등 다양한 1차 자료들을 활용하였다.

Induction of apoptosis by sanguinarine in C6 rat glioma cells

한민호 부산대학교 2007 국내석사

Sanguinarine, a benzophenanthridine alkaloid derived from the root of Sanguinaria canadensis and other poppy fumaria species, is known to exhibit anti-microbial, anti-inflammatory and anti-oxidant properties. This compound is known to exhibit significant selective cytotoxic activity against several human cancer cell lines, however, the mechanisms of which are not completely understood. In the present study, it was investigated the possible mechanisms by which sanguinarine exerts its anti-proliferative action in cultured C6 rat glioblastoma cells. Exposure of C6 cells to sanguinarine resulted in growth inhibition and induction of apoptosis in a dose-dependent manner as measured by MTT assay, fluorescence microscopy, agarose gel electrophoresis and annexin-V-based assay. The increase in apoptosis by sanguinarine was associated with the up-regulation of pro-apoptotic Bax expression as well as down-regulation of anti-apoptotic Bcl-2 and the inhibitor of apoptosis protein (IAP) family members such as XIAP and cIAP-1. Sanguinarine treatment induced the proteolytic activation of caspases and inhibitor of caspase-activated DNase/DNA fragmentation factor 45 (ICAD/DFF45), which was associated with a concomitant degradation of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) and phospholipase C (PLC)-γ1 protein and DNA fragmentation. z-DEVD-fmk, a caspase-3 specific inhibitor, blocked caspase-3 activation, PARP degradation, DNA fragmentation, and increased the survival rate of sanguinarine-treated C6 cells. Moreover, sanguinarine triggered the down-regulation of phosphorylation of extracellular regulated kinase (ERK) and Akt, and PD98059, a specific inhibitor of ERK, and LY294002, a specific inhibitor of Akt, but not SB203580 (an inhibitor of p38) and SP600125 (an inhibitor of JNK), sensitize sanguinarine-induced apoptosis. Taken together, it is suggested that sanguinarine can be a promising anti-cancer agent for glioblastoma cells and the modulations of Bcl-2 and IAP family, activation of caspase through down-regulation of the ERK and Akt signaling pathway may play critical roles in sanguinarine-induced apoptosis in C6 cells.

Development of Agrobacterium-mediated Transformation System of Green Microalgae Haematococcus pluvialis

한민호 성균관대학교 일반대학원 2008 국내석사

Haematococcus pluvialis has attracted a great deal of attention for the mass production of the ketocarotenoid astaxanthin under the disadvantageous environments. Astaxanthin has been shown to have higher antioxidant activity than β-carotene and α-tocopherol. This powerful antioxidant ability makes astaxanthin a quencher against free radicals and active oxygen species, an enhancer of the immune responses and an anticancer agent. The highlighted mass production of astaxanthin by Haematococcus remains problematic since inhibition of cell division occurs while astaxanthin is produced. There is an urgent need to develop a genetic transformation system for Haematococcus to understand further the molecular regulatory mechanism and to enhance astaxanthin production using genetic manipulation. H. pluvialis has an intact cell wall and no cell wall-deficient mutant has been obtained. The intact cell wall is a major obstacle of genetic transformation in H. pluvialis. There have been two reports of successful transformation of H. pluvialis by particle bombardment using the β-galactosidase gene (lacZ). Unfortunately, stable transformation was not obtained. Moreover, to date there have been no reports of dominant selective transformation system for H. pluvialis. Agrobacterium tumefaciens have ability of gene delivery into genome of trans-kingdom host. The molecular basis of this transformation revolves around the activities of a large (∼200 kb) tumor-inducing (Ti) plasmid resident in virulent strains. Specifically, a portion of the Ti plasmid, the transferred DNA (T-DNA), delineated by 23 base pair (bp) border repeats, is transferred into the host cells, integrated into the nuclear DNA, and expressed. The trans-kingdom gene transfer is initiated by the activity of Ti-plasmid encoded virulence (vir) genes in response to low molecular weight phenolic compounds like acetosyringone (AS). The ease of the procedure, the transfer DNA (up to 150 kb) with little rearrangements, preferential insertion of T-DNA into potentially transcribed regions. The integration of mostly single copy of the transgene(s) into plant chromosomes have made this a steadfast method for gene transfer to a large number of dicotyledonous plants. In fact monocotyledonous plants including cereals were also successfully transformed by this method. We report here the first successful transfer of T-DNA of Agrobacterium tumefaciens carrying the genes coding for green fluorescent protein (gfp) and hygromycin phosphotransferase (hpt) to the nuclear genome of the green alga Haematococcus pluvialis. Molecular and genetic analyses performed on transformants revealed the stable nuclear integration and expression of transgenes. The simplicity of Agrobacterium-mediated gene transfer and the high transformation frequency as well as the precision of T-DNA integration will enable further molecular investigations of this important model organism to understand basic plant metabolic processes as well as to exploit the system for biotechnological applications.