류마티스 관절염을 억제하는 물질의 탐색 및 기전 연구 = Screening and Mechanism Study of Anti-rheumatic Arthritis Substance

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Rheumatoid arthritis is an autoimmune disease that causes chronic inflammatory in the joints and causes fatal disorders in the joints. There are various inflammatory factors in the joint of patients with rheumatoid arthritis. The pro-inflammatory cytokines TNF-α, IL-6 and Nitric Oxide (NO) are the major causes and play an important role in the immune system. However, if it is overproduced, it will cause an inflammatory reaction. Thus, it is important to regulate TNF-α, IL-6 and NO.
In this study, we examined the effect of inhibiting inflammatory by using 628 kinds of natural products in the RAW 264.7 cells induced by LPS. As a result of screening, Cassia angustifolia Vahl was selected. Cassia angustifolia Vahl is widely used as laxatives. It is toxic to humans and can be used as a small amount of drug, and can not be used as a raw material for food. Therefore, several biological experiments were conducted to confirm the inhibitory effect of Cassia angustifolia Vahl methanol extract (CAM) on rheumatoid factor. The inflammatory response of RAW 264.7 cells was induced by LPS and the inhibitory effect of inflammatory factors was confirmed by MTT reduction assay, NO production assay, Morphological assay, ELISA assay.
As a result, inhibition of rheumatoid arthritis related factors of Cassia angustifolia Vahl in LPS induced RAW 264.7 cells was confirmed. Thus, Cassia angustifolia Vahl was given to the possibility to a natural drug material.

국문 초록 (Abstract)

류마티스 관절염은 자가면역질환 중 하나이며 관절에 만성적인 염증이 생겨 치명적인 장애를 일으키는 질환이다. 류마티스 관절염 환자의 관절 안에는 여러 가지 염증인자들이 생성되어 있다. 주로 pro-inflammatory cytokines인 TNF-α, IL-6와 NO가 주원인인데, 이들은 일반적으로 면역작용에서 중요한 역할을 하지만 과잉으로 생산되면 염증반응을 일으키게 된다. 따라서 류마티스 관절염은 염증으로부터 이어지며 과잉 생산되는 염증 인자들을 조절하는 것이 중요하다.
본 연구에서는 국내·외에서 자생하는 628종의 천연물자원을 대상으로 염증반응이 유도된 RAW 264.7 세포에 염증억제 효과를 가지는 물질을 탐색하기 위하여 screening을 실시하였고, 그 결과 센나엽을 선별할 수 있었다. 센나엽은 통변효과가 뛰어나 주로 완하제로 사용하고 있으며 사람에게 독성이 있어 소량의 약물로는 사용할 수 있으나 식품의 원료로는 사용하지 못하는 생약으로 분류되어 있다. 따라서 센나엽 methanol 추출물(CAM)의 류마티스 관련 인자 억제 효과를 확인하기 위해 여러 생물학적 실험을 실시하였다. RAW 264.7 세포의 염증반응은 LPS로부터 유도하였고, MTT reduction assay, NO production assay, Morphological assay, ELISA assay를 통하여 염증 인자 억제 효과를 확인하였다. 따라서 본 연구는 LPS로부터 염증반응이 유도된 RAW 264.7 세포에서 센나엽의 류마티스 관절염 관련 인자의 억제 효과를 확인하여 류마티스 관절염 치료제 개발의 가능성을 제시하고자 하는 바이다.

목차 (Table of Contents)

• 제 1장 서 론=1
• 제 2장 류마티스 관절염을 억제하는 물질의 탐색 및 기전 연구=3
• 2.1 서론=3
• 2.2 재료 및 방법=5
• 2.2.1 세포배양 및 처리=5
• 2.2.2 Morphological assay=5
• 2.2.3 Nitric Oxide production assay =6
• 2.2.4 MTT reduction assay=7
• 2.2.5 Western blotting analysis=8
• 2.2.6 Pro-inflammatory cytokines 측정=9
• 제 3장 결과 및 고찰=10
• 3.1 결과=10
• 3.1.1 LPS 처리에 의한 RAW 264.7의 형태학적 변화=10
• 3.1.2 LPS의 세포생존율 및 염증활성 평가=10
• 3.1.3 CAM 처리에 의한 RAW 264.7의 형태학적 변화=11
• 3.1.4 CAM의 NO 억제 활성 및 세포생존율 평가=11
• 3.1.5 CAM의 iNOS 발현 억제 활성=12
• 3.1.6 CAM의 pro-inflammatory cytokines 억제 활성=12
• 3.2 고찰=13
• 참고문헌=22
• ABSTRACT=24