인체 백혈구 공통항원(CD45)에 대한 단클론항체, AP4 = A Monoclonal Antibody AP4 against Human Leukocyte Common Antigen, CD45

국문 초록 (Abstract)

연구목적: 새로 만들어진 AP4 단클론항체가 인지하는 항원의 생화학적 특성과 생물학적 기능을 밝혀 보고자 하였다.
연구재료 및 방법: 마우스 단클론 아형분석 kit를 이용하여 AP4 단클론항체의 아형을 확인하였다. AP4에 반응성 있는 항원의 조직분포를 조사하기 위하여 정상 및 종양의 동결절편조직과 파라핀 포매 조직에 면역염색을 시행하였고 다양한 조혈계 정상 및 종양세포에 대하여 유세포 검사를 시행하였다. 생화학적 성질을 규명하기 위해 western bolt를 실시하였다. 뿐만 아니라 AP4 단클론항체의 기능을 확인하고자 ³H-thymidine 유입도 검사를 하였다.
결과: AP4 단클론항체의 아형은 IgG2b로 확인되었고 면역블롯팅 분석에서 네 개의 주요 밴드인 180, 190, 205, 220 kDa이 검색되었다. 유세포 분석과 조직면역화학염색 결과 적혈구를 제외한 모든 조혈세포에 높게 발현함을 확인하였다고, 파라핀 포매 악성림프종을 유용하게 진단할 수 있었다. AP4 단클론항체에 의한 림프구의 증식 및 억제효과는 관찰되지 않았다.
결론: 본 연구에서 새로운 단클론항체 AP4가 백혈구 공통항원인 CD45분자에 대한 항체임을 밝혔으며, AP4 단클론항체는 CD45군의 네 아형을 모두 인지하는 항체임을 확인할 수 있었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Purpose: We evaluated biochemical characteristics and biological function of the antigen recognized by a newly-made murine monoclonal antibody, named AP4.
Materials and Methods: The isotype of AP4 monoclonal antibody(mAb) was deternined by enzyme immunoassay using mouse monoclonal subisotyping kit. To investigate the tissue distribution pattern of the AP4 reactive antigen, immunohistochemical stain was done in cryostat and paraffin-embedded sections of normal lymphoid tissues and several malignant lymphoma tissues. Flowcytometric analysis of various leukemic cell lines, cell suspension of lymphoid tissues and peripheral blood were employed. The cell lysates of various lymphoid tissues and leukemic cell were used for western blot. To identify proliferative function of
AP4 mAb, 3H-thymidine uptake test was employed.
Results: The isotype of the AP4 mAb was determined IgG2b subclass. In immunoblot analysis, AP4 mAb detected four major bands of Mr 180, 190, 205, and 220 kDa. And the results of typical flowcytimetry and immunohistochemistry showed that the AP4 mAb were reactive with most of hematopoietic cells except red blood cell and were useful to diagnose paraffin-embedded malignant lymphomas. In addition, AP4 mAb revealed no effect of cell proliferation and suppression.
Conclusion: In this study, we described a new monoclonal antibody, AP4, which was reactive against leukocyte common antigen, CD45 molecules. This antibody appears to detect 4 isoforms on a group of CD45 molecules.