혈관내피세포-U937세포의 부착에 미치는 Eicosapentaenoic Acid의 효과 = Effect of Eicosapentaenoic Acid on Endothelial Cell-U937 Cell Adhesion

국문 초록 (Abstract)

연구배경:
역학적연구에서 어류의 섭취가 많은 집단에서 관상동맥질환의 빈도가 낮은 것이 보고되었고, 이것은 어류에 많이 함유된 불포화지방산(polyunsaturated fatty acid) 특히 eicosapentaenoic acid 때문으로 생각되어지고 있다. 본 연구에서는 동맥경화증 발생의 초기단계로 여겨지는 단핵구와 혈관내피세포 사이의 adhesion에 미치는 다불포화지방산의 영향을 in vitro system에서 관찰하고자 하였다.
방 법:
제대정맥에서 얻은 혈관내피세포를 배양하여 96 well에 옮기고 25, 50, 100, 200 ㎛ 농도의 eicosapentaenoic acid(EPA)를 6시간 동안 처리한 U937세포를 부착시켜 adhesion assay를 시행하였다. 혈관내피세포를 자극하기 위해서는 lipopolysaccharide(LPS)를 well당 100 ng씩을 투여하였다. 음성대조군으로는 LPS로 자극하지 않은 혈관내피세포에 EPA처리를 하지 않은 U937세포로 adhesion assay한 성적을 사용했고, 양성대조군으로는 LPS로 자극한 혈관내피세포에 EPA처리를 하지 않은 U937세포로 adhesion assay한 성적을 사용했다. 그리고 EPA(3.3 mM)을 5㎛ CuSO4 및 300 ㎛ asscorbic acid와 혼합하여 섭씨 37도에서 16시간 두어 산화-EPA를 만들어 같은 실험을 반복하였다.
결 과:
U937세포에 25, 50, 100, 200 ㎛의 EPA로 6시간 처리하였을 때 U937세포의 생존율은 99% 이상이었다. 혈관내피세포를 LPS로 자극했을 때 adhesion assay에서 혈관내피세포에 붙는 U937세포의 수는 현저히 증가하였다. 그러나 EPA를 U937세포에 25, 50, 100, 200 ㎛의 농도로 6시간 처리 후에 lipopolysac-charide를 처리한 제대정맥 내피세포에 부착(adhesion)시켰을 때 처리한 EPA의 각 농도에 따른 부착된 U937세포의 수는 통계적으로 유의한 차이를 나타내지 못했다. EPA처리가 부착된 U937세포의 수에 영향을 미치지 못하였다.
결 론:
EPA는 U937세포에 영향을 미쳐 혈관내피세포-U937 세포부착을 감소시키지는 못하였다. 따라서 EPA에 의한 혈관내피세포-단핵구 부착 억제 효과는 EPA의 단핵구에 미치는 영향에 의하지는 않는 것으로 생각되나 추후 더 많은 연구가 필요하리라 생각된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Background : Epidemiological studies have shown correlation between low incidence of coronary heart disease and high consumption of fish products. It has been suggested that this may be due to the high content of polyunsaturated fatty acids of the n-3 fatty acid group in fish oil. In animal studies eicosapentaenoic and (EPA) inhibited attachment of monocytes to the arterial endothlium. Method : Adhesion assay was performed on the endothelial cells of the human umbilical vein with 25, 50, 100, 200 ㎛ EPA-treated U937 cells. The endothelial cells were activated with lipopoysaccharide (LPS). The adhesion assay was repeated with oxidized EPA. EPA was oxidized with CuSO4 and ascorbic acid. Result : Viability of U937 cells were not afected by concentrations up to 200 ㎛ of EPAand oxidized EPA. LPS treatment of endothelium notably increased the number of U937 cells attached to endothelial cells on the adhesion assay. However, treatment of EPA, native or oxidized, to U937 cells did not afect the number of U937 cells attached to LPS activated endothelial cells. Conclusion : EPA treatment, native or oxidized, of U937 cells did not affect U937 cell-endothlial cell adhesion. This suggests that inhibition of monocyte-endothlial cells ◎attachment by EPA is not due to the effects of EPS on monocytes.(Korean Circulatin J 1998;28(4):606-610)