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생쥐 정원줄기세포에서 Early growth response 1의 발현과 GDNF에 의한 줄기세포 자가재생 조절
임주연,계명찬 한국발생생물학회 2014 한국발생생물학회 학술발표대회 Vol.2014 No.9
Early growth response 1(Egr1)은 zinc finger transcription factor로 다양한 성장인자, 물리적 자극에 따른 세포분화, 생장 및 사멸조절에 관여한다. Egr1 KO 생쥐 정소에서 maturation arrest, Sertoli cell only 등의 비정상 세정관이 증가한다. Glial Cell Derived Neurotrophic Factor(GDNF) 는 정원줄기세포(spermatogonial stem cell)의 자가재생 및 분화를 조절한다. 본 연구에서는 정원줄기세포에서 GDNF 수용체 하위 전사조절네트웍 규명의 일환으로 생쥐 정원줄기세포에서 Egr1 발현 특성을 분석하였다. 출생 0~56일 사이의 생쥐 정소에서 Egr1 발현을 면역조직화학적으로 분석하였다. 생후 6일 생쥐 정소의 세포들을 분산시킨 후 THY1 항체를 이용한 MACS법으로 정원줄기세포를 분리하여 GDNF (100 ng/ml)을 처리하였다. GDNF(100 ng/ml)을 처리 후 0, 2, 12시간에 Egr1, Egr2, Egr3, Egr4, GDNF 수용체인 RET와 GFRA1, 자가재생에 관련된 Etv5, Bcl6b mRNA 발현과 Egr1 단백질 발현량을 분석하였다. 한편 MAPK inhibitor(U0126, 10 μM) 처리 후 GDNF를 각각 2, 12시간 처리하여 mRNA 발현을 분석하였다. 그리고 Egr1 knock out mouse 정원줄기세포에서 GDNF를 12시간 처리하여 mRNA 발현을 분석하였다. 면역조직화학적 분석결과 Egr1은 gonocytes, spermatogonia, peritubular cells, Leydig cell에서 발현하였으나 분화된 세포에서는 발현이 저조하였다. 정원줄기세포에 GDNF 처리 후 2시간에 Egr1 mRNA가 유도되는 반면 Egr2, Egr3 mRNA는 12시간에 유도되었고, Egr4 mRNA는 변화하지 않았다. GDNF 수용체인 RET과 GFRA1 mRNA는 GDNF 처리군에서 증가하였다. Self-renewal에 관련된 Etv5와 Bcl6b mRNA는 12시간에 유도되었다. Egr1 단백질은 2시간에서 GDNF에 의해 증가하였다. U0126과 GDNF를 동시에 처리한 경우 2시간에 Egr1 mRNA가 유도되지 않았으며, 12시간에 Etv5와 Bcl6b mRNA발현도 변화가 없었다. Egr1 knock out mouse 정원줄기세포에 GDNF처리 시 Etv5, Egr2, Egr4 mRNA는 증가하는 반면 Bcl6b, Egr3 mRNA는 감소하였다. Egr1은 미성숙정소에서 gonocyte, spermatogonial stem cell, peritubular cell, Leydig cell에서 주로 발현된다. GDNF는 정원줄기세포에서 MAPK pathway에 의존적으로 Egr1을 유도하며, Egr1은 GDNF 수용체 및 자가재생 유전자발현을 통해 정원줄기세포의 stemness 유지에 중요한 기능을 담당하는 상위 전사인자로 사료된다. 또한 Egr1이 결손되어지면 세포자가재생에 관련된 Bcl6b의 전사가 억제되는 것으로 보아 세포생존, 증식에 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.
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고양 벽제 제철 유구 출토 철기의 분석을 통한 제철방법 연구
임주연,김수기 한국문화재보존과학회 2012 보존과학회지 Vol.28 No.4
철기 생산 기술은 당시 사회 발전을 가늠하는 척도로서 과거의 제철 방법을 이해하기 위한 철기 유물의 미세조직과개재물에 대한 다양한 연구가 진행되고 있다. 본 연구에서는 고려시대로 추정되는 고양 벽제 제철 유구에서 일괄로 수습된 철제 유물의 시편을 채취하여 광학현미경과 미세경도시험기, SEM-EDS를 이용하여 미세 조직의 성분분석을 통해 제철과 제련 기술을 추론하여 보았다. 연구결과 철괴는 주철괴와 탄소강 철괴로 분류되었다. 주철괴의 경우 백주철 조직과 인(P)의 함량이 높은 회주철 조직으로 분류되었으며 회주철 내 높은 P의 함량은 석회질 등의 융제가 첨가되며 혼입된 것으로 판단된다. 따라서 주철 조직의 철괴 및 고탄소강 철괴는 제련공정을 거치지 않은 선철들로 추정된다. 또한 철기 제작에는 크게 두가지 방법이 사용된 것으로 판단된다. 첫번째는 주물에 주철을 부어 제작하는 주철괴 제작방법이며, 두번째는 선철의 제련 공정을 통하여 생산되는 탄소강을 제작하는 방법이다. 특히 탄소강의 고른 강 조직과 적은 양의 MnS 개재물은 현대 제철 조직과 매우 유사한 특징을 지니나 고양 벽제 제철유구에서 수습된 탄소강 내 Mn의 함유에 대하여 판단하기에는 좀 더 많은 연구가 이루어져야 할 것이며, 주철의 제강공정을 통한 고탄소강의 생산 가능성도 염두에 두어야 할 것으로 사료된다.
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소아청소년 환자에서의 동종조혈모세포이식 후 발생한 폐쇄성세기관지염증후군의 임상적 특성
임주연,한승민,김효선,한정우,유철주 대한소아혈액종양학회 2015 Clinical Pediatric Hematology-Oncology Vol.22 No.2
Background: Bronchiolitis obliterans syndrome (BOS) is a life-threatening lung complication after allogenic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). As long-term survival following allogenic HSCT has improved, the number of BOS patients has been steadily increased. However, the survival and treatment of BOS have not improved significantly for decades. Identification of risk factors of BOS would improve the clinical outcome of allogenic HSCT recipients. Methods: We retrospectively investigated medical records of 147 allogenic HSCT recipients between 2005 and 2014 in Yonsei Cancer Center. Risk factors for BOS were analyzed with Chi-square test, logistic regression analysis, and the Student’s t-test. Results: BOS occurred to 23 patients (15.6%). Pulmonary function test (PFT) results before transplantation were similar in all patients, but patients with BOS had a significant decrease in forced expiratory volume in one second (FEV1) after transplantation compared with controls (68.4±26.4% vs. 91.6±21.0%, P<0.05). Acute graft-versus-host disease (GVHD) (OR 5.98, P=0.009) and peripheral blood as sources of stem cell (OR 4.00, P=0.031) increased risk for BOS, respectively. On the other hand, previously reported risk factors, such as age of donors and recipients, pulmonary infection within 100 days after allogenic HSCT and deference of immunosuppressant were not associated with increased the incidence of BOS in our study. Conclusion: We report here the result of a single-center study on the incidence, clinical factors, and outcome of BOS after allogenic HSCT. BOS is an important cause of post-transplantation morbidity and mortality. Risk reduction can be achieved by better prevention and control of BOS.
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생쥐 정원세포에서 early growth response-1의 발현과 GDNF에 의한 Egr-1의 유도
임주연,고일규,계명찬 한국발생생물학회 2013 한국발생생물학회 학술발표대회 Vol.2013 No.8
Early growth response-1(Egr-1)은 zinc finger transcription factor로 세포분화, 생장 및 사멸을 조절한다. Egr-1 KO 수컷 생쥐의 정소에서는 maturation arrest, Sertoli cell only 등의 비정상 세정관이 유의적으로 증가한다. Glial cell Derived Neurotrophic Factor(GDNF)는 고농도에서는 줄기세포 자가 재생, 저농도에서는 정원세포를 분화효과를 갖는다. 본 연구에서는 발생중인 생쥐 정소에서 Egr-1 발현을 확인하고, GDNF에 의한 spermatogonial stem cell의 stemness 조절 신호전달 기작연구의 일환으로 Egr-1 유도현상을 규명하고자 하였다. ICR 생쥐의 생후 1, 2, 4, 8주령 정소를 획득하여 RT-PCR과 면역조직화학법을 통해 Egr-1 발현을 확인하였다. 한편 생쥐의 생후 5일된 정소를 획득하여 THY1 항체를 이용한 MACS 방법으로 spermatogonial stem cell을 분리하였다. GDNF(1, 100 ng/ml)를 0, 0.5, 1, 2, 6시간 처리하고 Egr-1 mRNA 발현을 분석하였다. 생후 3~12개월령 Egr-1 KO 수컷 생쥐와 Hetero 수컷 생쥐의 정소를 획득하여 H&E 염색 후 정소 내 seminiferous tubule을 비교하였다. Egr-1 mRNA는 생후 1, 2주령까지 높게 발현하다가 성숙함에 따라 발현이 감소하였다. 면역조직화학적 분석 결과, Egr-1은 gonocytes, (stem)spermatogonia, 분열 중인 peritubular cells과 Leydig cells에서 발현하였다. MACS로 분리한 spermatogonial stem cell에서 GDNF 처리 시 Egr-1 mRNA 발현은 0.5시간과 1시간에 유의적으로 증가하였고, 6시간 후 다시 감소하였다. Egr-1은 정소에서 gonocytes, spermatogonial stem cells, peritubular cells, Leydig cells에서 주로 발현된다. MACS로 분리한 spermatogonial stem cell에서 GDNF에 의해 짧은 시간에 Egr-1 mRNA가 유도되는 것으로 보아, Egr-1은 GDNF에 의한 spermatogonial stem cell의 niche 유지에 중요한 기능을 담당하는 상위 전사인자로 사료된다.
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Molecular Neuroimaging in Posttraumatic Stress Disorder
임주연,윤수정,남궁은,최예지,김정윤,이정연 한국뇌신경과학회 2016 Experimental Neurobiology Vol.25 No.6
Over the past decade, an increasing number of neuroimaging studies have provided insight into the neurobiological mechanisms of posttraumatic stress disorder (PSTD). In particular, molecular neuroimaging techniques have been employed in examining metabolic and neurochemical processes in PTSD. This article reviews molecular neuroimaging studies in PTSD and focuses on findings using three imaging modalities including positron emission tomography (PET), single photon emission computed tomography (SPECT), and magnetic resonance spectroscopy (MRS). Although there were some inconsistences in the findings, patients with PTSD showed altered cerebral metabolism and perfusion, receptor bindings, and metabolite profiles in the limbic regions, medial prefrontal cortex, and temporal cortex. Studies that have investigated brain correlates of treatment response are also reviewed. Lastly, the limitations of the molecular neuroimaging studies and potential future research directions are discussed.
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