고리 매개 등온 증폭법을 이용한 vanA 및 vanB 신속 검출을 위한 진단 기술 평가 연구

장의석 청주대학교 대학원 2025 국내석사

This study aimed to evaluate the efficacy and reliability of vanA IC and vanB IC for the rapid and reliable detection of VRE using LAMP technology, in compliance with pharmaceutical test method validation guidelines. The study was designed to assess various validation criteria, including accuracy, precision, specificity, robustness, limit of detection, and linearity. The accuracy assessment showed a recovery rate of 96.39% for vanA plasmid DNA and 95.96% for vanB plasmid DNA. In the precisionevaluation, high reproducibility was confirmed through inter-operatorand repeatability tests. The specificity test indicated that only vanA and vanB plasmid DNA were accurately detected without nonspecific amplification. For limit of detection, vanA was detectable down to 10⁻⁵ ng/μL, and vanB to 10⁻4 ng/μL. In robustness testing, vanA plasmid DNA amplification remained stable across a range of temperatures from 55 ℃ to 70 ℃, while vanBplasmid DNA showed stability only at 60 ℃ and 65 ℃. Linearity evaluation confirmed a reliable relationship between concentration and amplification signal through regression analysis, with an R² value of 0.96 for vanA plasmid DNA and 0.98 for vanB plasmid DNA, demonstrating that the LAMP reaction yields consistent results with changes inconcentration. This research demonstrates that the LAMP-based vanA IC and vanB IC satisfy the test method validation requirements, proving to be suitable methods for the rapid and reliable detection of vanA and vanB plasmid DNA. Test method validation is a critical process to ensure consistent and reliable results, guaranteeing the accuracy and depen dability of analyses, which minimizes errors in diagnosis and treatment and enhances the quality of clinical decision-making. Accurate and prompt results are especially vital in the diagnosis of antibiotic-resistant bacteria, such as VRE, as they directly influence patient treatment strategies, highlighting the importance of reliable method validation. The fact that the LAMP-based diagnostic methods for vanA and vanB plasmid DNA meet all test method validation requirements underscores the practical potential of this technology for clinical use and establishes a standardized approach for VRE diagnosis. 본 연구는 병원 내 주요 감염원인 반코마이신 내성 장구균(Vancomycin-Resistant Enterococci, VRE)를 신속하고 신뢰성 있게 진단하기 위해Loop-Mediated Isothermal Amplification(LAMP) 기술을 기반으로 한진단 분석법을 개발하고, 임상적 신뢰성을 확보하기 위한 시험 방법 밸리데이션을 수행하는 데 중점을 두었다. VRE는 기존 항생제에 내성을지녀 치료가 어렵고, 면역력이 약한 환자들에게 치명적일 수 있어 감염관리에 큰 위협이 된다. 이로 인해 VRE는 병원 내에서 엄격한 관리가필요하며, 신속한 진단 분석법을 통해 감염 확산을 조기에 차단하는 것이 중요하다. 기존의 Polymerase Chain Reaction(PCR) 기반 진단 분석법은 높은 민감도와 특이성을 자랑하지만, 복잡한 장비와 긴 소요 시간이 필요하여 병원 현장에서 신속히 적용하기에 어려움이 있다. PCR 방법은 시간 소모적일 뿐만 아니라 숙련된 인력이 필요해 의료 현장에서즉각적인 대응이 어렵다. 이에 반해, LAMP 기술은 일정한 온도에서 DNA를 증폭할 수 있어 별도의 열순환 장비 없이도 단시간에 검출이 가능하므로 현장 적용이 용이하고 신속한 결과를 제공한다. 또한, LAMP기술은 간편한 프로토콜과 저비용으로 인해 효율적이며, 이동식 장비로도 검사가 가능하여 감염이 의심되는 현장에서 즉각적이고 경제적으로대응할 수 있다. 본 연구에서는 이러한 LAMP 기술의 장점을 활용하여VRE의 주요 내성 유전자인 vanA와 vanB 플라스미드 DNA를 표적으로하는 진단 분석법을 개발하였다. vanA 플라스미드 DNA는 1032 bp의Insert DNA와 1987 bp의 벡터로 결합된 3019 bp 크기로, vanB 플라스미드 DNA는 1029 bp의 Insert DNA와 벡터 크기를 합쳐 3016 bp 크기로확인되었다. NanoDrop을 활용한 정량 결과에서 vanA 플라스미드 DNA는 평균 농도 1.14 × 10² ng/μL, A260/A280이 1.76, A260/A230이 2.13,vanB 플라스미드 DNA는 평균 농도 1.09 × 10² ng/μL, A260/A280이 1.82, A260/A230이 2.09로 측정되었다. 이를 바탕으로 정확성, 정밀성, 특이성, 완건성, 검출한계, 직선성 등 시험 방법 밸리데이션의 주요 항목을평가하였다. 정확성은 측정된 값이 실제 값과 얼마나 일치하는지 회수율기준으로 검증하였고, vanA 플라스미드 DNA의 회수율은 96.39%, vanB플라스미드 DNA는 95.96%로 나타났다. 정밀성은 반복 실험에서의 일관성을 확인하고, 여러 시험자가 수행한 실험 간 재현성을 확보하였다. vanA 플라스미드 DNA의 반복성 실험 상대 표준 편차(relative standard deviation, RSD)는 4.91%, vanB 플라스미드 DNA는 3.95%로 측정되었으며, 실험실 내 정밀성 RSD는 vanA 1.57%, vanB 3.17%로 높은 정밀성을 확인하였다. 특이성 실험에서는 LAMP 진단 분석법이 반코마이신 내성 유전자인 vanA 및 vanB 내성 유전자만을 검출하였으며, 대조군에서증폭이 발생하지 않았다. 완건성 실험 결과, vanA 플라스미드 DNA는온도 변화와 시약 농도 변화에 모두 안정적인 반응을 보였고, vanB 플라스미드 DNA는 특정 조건에서만 안정적인 증폭을 나타내었다. 검출한계는 vanA 플라스미드 DNA가 10⁻⁵ ng/μL, vanB 플라스미드 DNA가 10⁻⁴ ng/μL로 나타났으며, 직선성 평가에서 vanA는 R² 값 0.96, vanB는R² 값 0.98로 농도와 Ct 값 간의 직선적 상관관계를 보였다. 본 연구의결과는 LAMP 기반 VRE 진단 분석법이 병원 내 감염 관리에 실질적으로 기여할 수 있는 가능성을 시사하며, 신속하고 간편한 내성균 검출 가능성을 보여준다. 아울러 본 연구의 시험 방법 밸리데이션 결과는 VRE외에도 다양한 다제내성균 감염의 신속 진단을 위한 분자 진단 도구로서의 확장 가능성을 제시한다. 향후 이러한 연구는 의료 현장에서의 유용성을 더욱 높여 감염병 대응에 효과적인 기여를 할 수 있을 것이다.

미용산업의 프랜차이즈 사업 타당성을 위한 탐색적 연구 : 네일아트를 중심으로

장의석 한국항공대학교 항공경영대학원 2011 국내석사

최근 우리나라는 정치, 경제, 사회, 문화 등의 다방면에서 유래 없는 급속한 발전을 이루어내면서 경제수준의 향상으로 인해 의․식․주에 대한 인간의 기본적인 욕구를 넘어 다양한 욕구를 추구하게 되었다. 또한 여성의 사회진출에 대한 기회가 넓어지면서 외모를 중요시하고 자기 자신을 꾸미는 행위에 대한 소비자의 관심과 수요가 점차 커지고 있다. 이러한 소비자들의 다양한 욕구를 충족시키기 위하여 미용서비스는 점차 전문화, 세분화되고 있으며 서비스의 질을 우선시 하는 경향이 나타나고 있다. 미용산업의 발전이라는 측면에서 볼 때, 현재 우리나라 네일살롱은 1990년대의 미용실에서 보였던 생계형 영세업체의 난립으로 인해, 경영악화가 심화되고 있어 표준화되고 획일화된 차별화된 서비스의 도입이 시급한 실정이다. 이에 본 연구는 네일살롱 예비창업자들을 대상으로 창업형태에 따른 선택요인이 무엇인지, 예비창업자들이 네일살롱을 운영하는데 있어서 무엇을 가장 중요하게 고려하는지를 찾아 경영형태 선택 시 어떠한 영향을 주는지 이를 밝히고, 보다 성공적인 경영형태를 강구하여 안정적이고 효율적인 네일살롱 프랜차이즈 업체의 역할은 무엇인지를 밝히는데 본 연구의 가치를 갖고자 한다. 연구대상은 서울 및 경기지역에 거주하는 네일아트 학원 수강생 및 한국네일협회 2급 자격증 취득자 등의 네일살롱 예비창업자 227명에게 설문지를 이용하여 연구하였으며, 자료분석은 SPSS WIN 통계프로그램 18.0K을 이용하여 분석하였고, 분석기법으로는 네일살롱의 이용실태와 네일살롱 창업시 고려하는 사항, 경영형태, 선택동기와 일반적 특성을 살펴보기 위해 빈도분석과 교차분석을 실시하여 빈도와 백분율로 산출하였고 프랜차이즈 네일살롱과 독립점포 네일살롱의 창업 경영방식에 따른 예비창업자들의 선택동기의 평균차를 보기 위해서 Repeted ANOVA를 실시하였다. 연구를 통해 얻은 결과는 다음과 같다. 첫째, 예비창업들이 선호하는 입지 조건은 경영형태에 따라, 독립점포 네일살롱 창업 희망자들은 번화상권 및 아파트 단지 등의 거주지를 선호하고, 프랜차이즈 네일살롱 창업 희망자들은 번화상권 및 마트, 백화점, 쇼핑몰 등의 장소를 선호하여 상호 및 브랜드의 노출이 높은 장소일수록 프랜차이즈 경영형태를 선호하는 것으로 나타났다. 둘째, 프랜차이즈 네일살롱 창업희망자들은 독립점포 네일살롱 창업희망자에 비해 더욱 높은 수준의 창업자금과 넓은 매장면적을 선호하는 것으로 나타났다. 셋째, 예비창업자들이 프랜차이즈 네일살롱을 선택하게 된 동기는 본사로부터 지속적인 관리가 이루어지고 체계적인 교육을 지원받을 수 있기 때문인 것으로 나타났다. 넷째, 예비창업자들이 독립점포 네일살롱을 선택하게 된 동기는 네일살롱의 독창적인 인테리어를 위해서, 로열티 등의 비용절감을 위해서 때문인 것으로 나타났다. 다섯째, 네일살롱을 운영하는데 있어 예비창업자들은 네일리스트의 기술력과 서비스 마인드가 가장 중요하게 고려하는 사항으로 나타났다. 이제 걸음마 단계의 태동기 산업인 네일산업의 프랜차이즈 사업의 가능성을 파악하고 이에 영향을 미치는 제 요인들을 분석하여 체계적이고 효과적인 프랜차이즈 네일살롱으로 발전될 수 있도록 프랜차이즈 네일살롱의 산업화와 기업화의 기초 자료로 제시하는데 그 가치를 두고자 한다. Korea has been achieving political, economic, social and cultural advancements at an unprecedented rate as of late. This led to enhancement of economic standard and, as a result, people started pursuing diverse needs far above the basic human desires centering on the necessities of life, such as food, clothing and shelter. In addition, as the door for women’s entry into social affairs broadened, consumers’ interest in and demand for the act of grooming increased gradually and they began placing greater importance on the outer appearance. To satisfy consumers’ diverse needs, cosmetics industry is becoming segmented into more specialized fields. In addition, there is a trend of prioritizing quality of the services offered. From the view point of the cosmetics industry development, nail salons in Korea experience deterioration in business environment as a result of the sprawling of bread-and-butter type small shops showing characteristics of the beauty salons in the 1990s. This brought about an urgent need for introduction of differentiated services in the standardized and uniformed manner. Hence, this study aimed at identifying the factors considered by potential founders of nail salon business in deciding the type of business startup and the factors most importantly considered in operating nail salon business and therefore at discussing impacts of these factors on determining the form of management. It also aimed at examining the roles of stable and efficient nail salon franchisors by devising more successful form of management. For this study, a questionnaire survey was conducted on 227 potential nail salon business founders who, as people residing in Seoul and Gyeonggi-do areas, are attending nail technician schools and have obtained level 2 qualifications from Korea nail Association. SPSS WIN statistics program 18.0K was used to analyze the collected data. To examine the status of nail salon use, factors considered in starting up a nail salon business, form of management, motives for selection and general characteristics, frequency analysis and cross-tabulation analysis were conducted to calculate the results in the units of frequency and percentage. In addition, repeated ANOVA was conducted to examine the mean difference of the motives for selection by potential founders according to the business startup and management styles of franchise and independent nail salons. Results of the study are as outlined below. First, as business locations preferred by potential founders according to the form of management, potential founders of independent nail salon business preferred main business districts and residential areas including apartment complexes, while potential founders of franchised nail salon business preferred shopping centers, marts and department stores as well as main business districts. This result indicated that the form of franchise business management was more preferred in areas with higher business name and brand exposure. Second, potential founders of franchised nail salon business preferred larger store spaces and startup funds than the potential founders of independent nail salon business. Third, motives with which potential founders selected franchised nail salon business were found to be continuous management and systematic training services from the head office. Fourth, motives with which potential founders selected independent nail salon business were found to be freedom to decide store designs and cost reduction by saving on the franchise fee, etc. Fifth, nail technicians’ skills and dedication to service were the factors most importantly considered by potential founders in running nail salon business. This study is meaningful in that it identifies the feasibility of franchise business in the nail industry, which is in the embryonic stage at present, and analyzes diverse factors affecting it and therefore produces results that can be utilized as reference data for industrialization and commercialization of franchised nail salon business in order to contribute to systematic and effective advancement of the business