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      • アラキドン酸に特異的な新しいラツト脂肪酸活性化酵素の構造と性質

        강만종 東北大學大學院 1996 해외박사

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        세포막의 인지질로 부터 유리된 아라키든산의 일부분은 생리 활성물질인 프 로스타글란딘과 루코트리엔으로 변환되어 염증반응등 다양한 반응을 일으킨다 프로스타글란딘과 루코트리엔으로 변환되는 아라키든산은 유리 아라키든산의 약5%이며 나머지의 아라키든산은 아실 CoA 합성효소에 의하여 아라키드닐 CoA 로 변환되어 인지질로 다시 에스테르화 된다. 이러한 메카니즘에 의하여 아 라키든산으로 부터 생리 활성이 높은 프로스타글란딘과 루코트리엔의 생성이 조절 된다고 보고 되고있다. 그러나 이러한 역할을 수행하는 아라키든산에 특이적인 아실 CoA합성효소의 실체는 효소학적 방법에 의하여 존재여부가 제 시되고 있으나 그 실체는 불분명하다. 본 연구에서는 아라키든산과 에이코사펜타엔산에 특이적인 새로운 흰쥐 아 실 CoA 합성효소의 cDNA를 단리하고 그 구조 및 성질을 명확히 했다. 이 cDNA은 개시 코돈 ATG로 부터 2010염기, 670개의 아미노산으로 구성된 단일 번역 영역을 가지고 있다. Northern blot 결과 이 효소는 부신에 가장 높은 발현을 보이고, 지방 조직, 뇌, 폐, 간장에서도 검출되었다. 또한 뇌 발달 과정에서는 미에린의 형성전의 시기에 가장 높은 발현을 하고 있어 이 효소가 뇌 발달에 중요한 역할을 수행하고 있는 것으로 생각된다. 그리고 Genomic D NA의 Southern blot에 의하면 이 유전자는 X-염색체에 존재할 가능성을 제시 하고 있다. 이 효소를 대장균에 발현 시키고 재조합 단백질을 정제한 다음 반응 속도론적 해석을 행한 결과, 이 효소는 포화지방산과 불포화지방산중에 아라키돈산과 에이코사펜타엔산에 대하여 높은 친화성을 가지고 있는 것으로 확인 되었다. 또한 이 효소는 세포 분획법에 의하여 해석한 결과 미토콘드리 아, 페옥시솜, 미크로솜에 존재 했다. 이상과 같은 결과는 지금까지 증명되 지 않은 아라키돈산에 특이적인 아실 CoA 합성효소의 존재를 분자생물학적 방 법으로 증명하고 그 성질을 제시 하고 있으며, 아라키돈산으로 부터 프로스타 글란딘의 대사 메카니즘을 재구성 하는데 중요한 기초적 지식을 제시하고 있 다. Based on the development of a direct mini-emulsification technique, uniform latexes of anionically polymerized deuterated polystrene (DPS) and protonated polystyrene (HPS) were prepared. One group of samples consisted of six mol percent DPS particles with molecular weight 150,000 g/mol with the balance being HPS of the same molecular weight. Another group consisted of the same proportions of the two components but the molecular weights were 185,000 g/mol and 200,000 g/mol, respectively. Films from both groups were annealed at several temperatures above Tg for various periods of time, and characterized by small-angle neutron scattering (SANS). In addition, 100 % HPS films were prepared to determine the tensile strength of the films for correlating with the SANS data. rates Direct mini-emulsified latex films had greater interdiffusion and higher tensile strengths than conventional emulsion polymerized latex system at similar molecular weights and annealing times. These differences may be due to the polydisperse nature of the molecular weight distribution and/or to the large and polar chain end groups of the emulsion polymerized system. The average interpenetration depth of deuterated polystyrene chains was dependent on the one-fourth power of the annealing time up to the reptation time. This power law value w a s shifted to just above the one-half power after-the reptation time, roughly consistent with Wool's minor chain reptation model. The diffusion coefficients from the SANS data were 2.4×10-16 cm2/sec for Mn=l50,000 g/mol, and ㎠/sec for Mn=l85,000 g/㏖ at annealing temperature of 135OC. The diffusive activation energies of the present system were 48 and 55 kcal/mol for the molecular weight 150,000 and 185,000 g/mol, respectively, in the temperature range of 125≤T≤155℃. Initially, tensile strength increased with annealing time to the one-half power. The samples reached full tensile strength of 33 MPa at an interpenetration depth of 90-100 Å for Mn=l50,000 g/mol and 38 MPa at 105-115 Å for Mn=l85,000 g/mol. These interpenetration depth data are comparable to 0.81 times of the radius of gyration of the whole polystyrene chain predicted by theory. The tensile strength curve as a function of annealing time goes through a maximum, then levels off, most likely due to a change in the fracture path from through the particle-particle interface to through the particle at annealing times of about 30 and 60 minutes for Mn=150,000 and 185,000 g/mol, repectively. In order to see the effect of co-surfactants (cetyl alcohol and stearyl alcohol) as a plasticizer, mimi-emulsified latex films containing 1.5 wt % co-surfactants were characterized by SANS and tensile strength. Polymer diffusion rates at times shorter than the reptation time were not significantly affected by co-surfactants; at times longer than the reptation time the diffusion rate increased with the addition of a small amount of co-surfactant. The activation energy (30 kcal/mol) from the Arrhenius plot was found to be lower than that of the pure polystyrene latex (48 kcal/mol).

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